| BMP-7/GFP融合基因在人肾小管上皮细胞的表达与定位 |
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| 引用本文： | 李娅,陈楠,陈佳韵,王伟铭.BMP-7/GFP融合基因在人肾小管上皮细胞的表达与定位[J].上海交通大学学报(医学版),2004,24(8). |
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| 作者姓名： | 李娅 陈楠 陈佳韵 王伟铭 |
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| 作者单位： | 上海第二医科大学瑞金医院肾脏科,上海,200025 |
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| 基金项目： | 上海市科委资助项目，上海市卫生局资助项目 |
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| 摘 要： | 目的构建骨成形蛋白-7(BMP-7)/绿色荧光蛋白(GFP)融合基因,观察其在人肾小管上皮细胞的表达与定位.方法将小鼠BMP-7全长cDNA与GFP融合,连接进入真核细胞表达质粒pEGFP-C1中,以脂质体介导的方法将重组表达质粒pEGFP-C1-BMP-7转染入人肾小管上皮细胞.采用Western blot方法检测BMP -7在肾小管上皮细胞的表达;激光共聚焦荧光显微镜观察BMP-7在人肾小管上皮细胞中的定位情况.结果限制性酶切以及DNA测序结果均说明所构建的重组质粒为BMP-7/GFP融合基因表达质粒.瞬时转染人肾小管上皮细胞BMP-7蛋白表达量较空载体转染组明显增加;GFP转染的细胞荧光均匀分布在整个细胞中,而pEGFP-C1-BMP-7转染的细胞荧光主要集中在细胞浆和细胞膜表面.结论重组BMP-7/GFP融合蛋白具有GFP自发荧光的特性,且不影响BMP-7在细胞内的正确表达.
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| 关 键 词： | 骨成形蛋白-7 近曲肾小管上皮细胞 绿色荧光蛋白 |
Expression and localization of bone morphogenetic protein-7-GFP fused gene in human renal tubular epithelial cell line |
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