体外培养人胎儿软骨细胞的生物学特性 |
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引用本文: | 张英,周广东,崔磊,刘伟,曹谊林.体外培养人胎儿软骨细胞的生物学特性[J].上海交通大学学报(医学版),2004,24(4). |
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作者姓名: | 张英 周广东 崔磊 刘伟 曹谊林 |
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作者单位: | 上海第二医科大学第九人民医院整复外科,上海市组织工程研究与开发中心,上海,200235 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展计划(973计划),国家高技术研究发展计划(863计划) |
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摘 要: | 目的建立人胎儿软骨细胞分离培养、扩增技术体系,研究其体外单层培养条件下的生长特性,探讨胎儿软骨细胞作为软骨组织工程种子细胞的可行性.方法酶消化法获取胎儿软骨细胞,体外培养扩增,经测定细胞生长曲线、群体倍增时间及累计倍增数目,观察细胞生长动力学并确定体外生长规律.通过免疫组织化学检测Ⅱ型胶原分泌,阿利辛蓝比色法测定基质糖胺多糖(GAG)含量.P1细胞接种于聚羟乙酸(PGA)纤维支架,观察两者生物相容性及细胞体外成软骨能力.结果关节软骨细胞形态呈典型的多角形,随着传代的次数增加,逐渐变成"成纤维细胞样"的条梭形.平均倍增时间为74 h.细胞连续培养5代,累计倍增数目为7.83±0.42.P1~P5间接免疫组化Ⅱ型胶原表达阳性,P6不表达.GAG含量P1细胞低于P0细胞,随体外培养时间延长逐渐增加.P1细胞接种于PGA纤维支架,体外培养14 d,组织学观察显示有软骨组织形成.结论胎儿软骨细胞经常规体外培养,至第6代失去分泌软骨特异性基质的功能.P1细胞接种PGA纤维展现良好的生物相容性,初步证实胎儿软骨细胞作为软骨组织工程种子细胞的可行性.
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关 键 词: | 胎儿软骨细胞 生物学特性 组织工程 |
Biological characterization of in vitro cultured human fetal chondrocytes |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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