| 重组降血压肽VLPVPR酶解制备工艺优化及降解原因分析 |
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| 引用本文： | 肖平,孙海燕,刘冬,周丽珍,李艳.重组降血压肽VLPVPR酶解制备工艺优化及降解原因分析[J].中国组织工程研究与临床康复,2010,14(25). |
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| 作者姓名： | 肖平 孙海燕 刘冬 周丽珍 李艳 |
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| 作者单位： | 1. 广西大学轻工与食品工程学院,广西壮族自治区南宁市,530004
2. 深圳职业技术学院,广东省深圳市,518055 |
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| 基金项目： | 广东省科技厅科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 背景:采用基因工程技术与酶解法制备重组降血压肽VLPVPR,酶解产物为多肽混合物,易受微生物侵染而发生降解.目的:分析胰蛋白酶酶解制备重组降血压肽VLPVPR过程中影响VLPVPR稳定性的因素,并对酶解工艺进行了优化.方法:采用反相高效液相色谱法检测酶解产物中降血压肽VLPVPR的含量.工程菌表达产物经0.22 μm膜过滤除菌,观察其酶解过程中降血压肽VLPVPR含量随时间的变化情况,与不过滤除菌酶解过程进行比较,探讨杂菌污染和工程菌自身蛋白水解酶对VLPVPR降解的影响.采用正交试验对温度、pH、酶浓度和时间等酶解工艺参数进行优化.结果与结论:降血压肽VLPVPR标准品与胰蛋白酶作用4 h,含量基本不发生变化,差异无显著性意义(P＞0.05),说明胰蛋白酶不能再进一步降解VLPVPR.经过过滤除菌后的细胞破碎上清液在酶解过程中的VLPVPR含量在达到最大后迅速降低,未经过滤除菌的样品中的降血压肽比过滤除菌的样品降解得更快,差异有显著性意义(P＜0.05),表明工程菌释放的胞内酶和杂菌污染是导致VLPVPR降解的主要原因.通过正交试验优化了酶解制备重组降血压肽VLPVPR的最佳条件:温度30℃,pH9.5,胰蛋白酶终浓度180 U/mL,酶解时间1 h.
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| 关 键 词： | 降血压肽 制备 酶解 降解 生物材料与生物技术 |
Enzymolysis technology optimization and degradation reasons of recombinant antihypertensive peptides VLPVPR |
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| Xiao Ping,Sun Hai-yan,Liu Dong,Zhou Li-zhen,Li Yan.Enzymolysis technology optimization and degradation reasons of recombinant antihypertensive peptides VLPVPR[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2010,14(25). |
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| Authors: | Xiao Ping Sun Hai-yan Liu Dong Zhou Li-zhen Li Yan |
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