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TCRVβ7.1基因修饰的T细胞对肝癌细胞体外杀伤及体内靶向识别作用的研究
引用本文:吕丽珊,王金全,邵红伟,黄树林. TCRVβ7.1基因修饰的T细胞对肝癌细胞体外杀伤及体内靶向识别作用的研究[J]. 中国医药生物技术, 2007, 2(6): 416-421
作者姓名:吕丽珊  王金全  邵红伟  黄树林
作者单位:1. 广东药学院生命科学与生物制药学院,广州,510006
2. 510006,广州,广东药学院生命科学与生物制药学院;510006,广州,广东药学院生物制药研究所
基金项目:国家自然科学基金;广东省自然科学基金;广东省科技厅科技计划
摘    要:目的探讨TCRVβ7.1基因修饰的T细胞对肝癌细胞的体外杀伤活性及其在体内靶向识别肝癌细胞的作用。方法①体外实验:以特异性识别肝癌细胞的TCRVβ7.1基因转染健康人外周血单个核细胞(PBMC),转染前和转染后24、48h用流式细胞术检测转染基因的表达。将人肝癌BEL-7402细胞分为4组,其中3组分别与未经修饰的PBMC(PBMC组)、转染pcDNA3.1空质粒的PBMC(空质粒组)、转染TCRVβ7.1基因的PBMC(基因修饰组)共培养,1组作为阴性对照组。共培养前和共培养24、48h,以噻唑蓝(MTT)法检测PBMC对人肝癌BEL-7402细胞的杀伤活性。②体内实验:用重度联合免疫缺陷小鼠建立荷肝癌动物模型,于肿瘤周围皮下注射基因修饰的PBMC,于注射后2、7、14、28、42d各处死2只小鼠,分别取肿瘤、脾、肝、肺、肠、卵巢、心、脑、肾组织,检测基因修饰的PBMC在小鼠体内的存活时间及组织分布情况。结果①体外实验:流式细胞术检测表明TCRVβ7.1基因成功转染到T细胞并得到有效表达。MTT法检测显示,基因修饰组T细胞对肿瘤细胞的杀伤率(24、48h分别为31.24%±2.26%、40.95%±3.45%)明显高于PBMC组(分别为6.92%±3.12%、7.84%±2.29%)和空质粒组(分别为9.23%±2.46%、10.36%±3.34%),差异均有统计学意义(P<0.01)。②体内实验:肿瘤周围注射基因修饰的PBMC后2d,小鼠肿瘤组织已经出现PBMC(8个/视野),随时间延长PBMC数量呈上升趋势,28d达最大值(18个/视野)。取材于不同时间的小鼠组织标本的检测显示,基因修饰的PBMC只分布于肿瘤组织,而在其他组织中没有出现。结论TCRVβ7.1基因修饰可诱导T细胞活化并提高T细胞对肝癌细胞的杀伤活性;外源性TCRVβ7.1基因修饰T细胞在荷肝癌小鼠体内的分布具有肿瘤靶向性。

关 键 词:基因,T细胞受体  受体,抗原,T细胞  转染  肝肿瘤  肿瘤细胞,培养的
修稿时间:2007-09-15

In vitro cytotoxic and in vivo targeting effects of TCRVβ7.1 gene-modified T cells on liver cancer cells
L Li-shan,WANG Jin-quan,SHAO Hong-wei,HUANG Shu-lin. In vitro cytotoxic and in vivo targeting effects of TCRVβ7.1 gene-modified T cells on liver cancer cells[J]. Chinese Medicinal Biotechnology, 2007, 2(6): 416-421
Authors:L Li-shan  WANG Jin-quan  SHAO Hong-wei  HUANG Shu-lin
Affiliation:L(U) Li-shan,WANG Jin-quan,SHAO Hong-wei,HUANG Shu-lin
Abstract:
Keywords:Genes   T-cell receptor  Receptors   antigen   T-cell  Transfection  Liver neoplasms  Tumor cells   cultured
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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