抗α1-抗胰蛋白酶多克隆抗体的制备、纯化和鉴定 |
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引用本文: | 王彩霞,朱建思,周见远,冯惊涛,赵辉,邓海欧,吴小晋,聂东宋.抗α1-抗胰蛋白酶多克隆抗体的制备、纯化和鉴定[J].国际生物制品学杂志,2009,32(3). |
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作者姓名: | 王彩霞 朱建思 周见远 冯惊涛 赵辉 邓海欧 吴小晋 聂东宋 |
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作者单位: | 1. 南华大学肿瘤研究所,衡阳,421001 2. 湖南景达生物工程有限公司科研办公室,岳阳,414000 3. 湖南省岳阳市中心血站检验科,414000 |
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摘 要: | 目的 用α1-抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,α1-AT)免疫家兔以产生多克隆抗体,并对产生的抗体进行有效地纯化和效价鉴定,建立抗α1-AT多克隆抗体的生产工艺.方法 按照常规方法免疫健康家兔进行抗α1-AT多克隆抗体的制备,用ELISA检测血清抗体效价.处死抗血清效价合格的家兔,取血、离心,获取抗血清.联合应用辛酸-硫酸铵沉淀法和A蛋白亲和层析法对抗血清进行纯化,纯化的多克隆抗体经15%十二烷基硫酸钠.聚丙烯酰胺凝胶电泳分析纯度后,用ELISA测定效价.结果 ELISA检测表明,家兔产生的抗α1-AT多克隆抗体效价大于105.联合应用辛酸-硫酸铵沉淀法和A蛋白亲和层析法进行纯化获得了纯度高、活性好的抗α1-ATT多克隆抗体.结论 成功建立了抗α1-AT多克隆抗体的生产和纯化工艺.
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关 键 词: | α1抗胰蛋白酶 多克隆抗体 制备 纯化 鉴定 |
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