| 人破骨细胞抑制因子基因的克隆和表达 |
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| 引用本文： | 韩苇,张英起,颜真,石继红. 人破骨细胞抑制因子基因的克隆和表达[J]. 医学争鸣, 2002, 23(22): 2036-2039 |
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| 作者姓名： | 韩苇 张英起 颜真 石继红 |
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| 作者单位： | 第四军医大学科研部生物技术中心,陕西,西安,710033 |
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| 摘 要： | 目的 克隆、表达和鉴定人破骨细胞抑制因子(OPG) .方法 从培养的人胚肺成纤维细胞 (WI- 38)中提取总 RNA,经 RT- PCR获得人破骨细胞抑制因子基因 .将该基因克隆到 p GEM3zf-载体中 ,测序鉴定 .继而将 OPG基因插入 TNFHis融合表达载体中 ,4 2℃诱导表达 4～ 5 h,做 SDS-PAGE分析 .以免疫印迹法鉴定 TNFHis OPG融合蛋白的表达 .结果 DNA测序证明 ,获得了 OPG基因 ,其序列与国外文献报道不完全一致 .SDS- PAGE分析表明 ,TNFHis OPG融合蛋白获得表达 ,其 Mr为 7.1× 10 4 ku,表达量约占菌体总蛋白的 10 % .免疫印迹法鉴定显示 ,该融合蛋白可与抗 TNF-α单抗产生阳性反应 .结论 OPG基因的克隆和表达均获得了成功 .
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| 关 键 词： | 破骨细胞 抑制因子免疫 逆转录聚合酶链反应 基因表达 克隆 |
| 文章编号： | 1000-2790(2002)22-2036-04 |
| 修稿时间： | 2002-08-22 |
Clone and expression of human osteoprotegerin gene |
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| HAN Wei,ZHANG Ying Qi,YAN Zhen,SHI Ji Hong Center of Biotechnology,Research Administration,Fourth Military Medical University,Xi'an ,China. Clone and expression of human osteoprotegerin gene[J]. Negative, 2002, 23(22): 2036-2039 |
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| Authors: | HAN Wei ZHANG Ying Qi YAN Zhen SHI Ji Hong Center of Biotechnology Research Administration Fourth Military Medical University Xi'an China |
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| Affiliation: | HAN Wei,ZHANG Ying Qi,YAN Zhen,SHI Ji Hong Center of Biotechnology,Research Administration,Fourth Military Medical University,Xi'an 710033,China |
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