As2O3联用华蟾素对K562细胞Bcr-Abl磷酸化的影响

目的 研究As2O3联用华蟾素对K562细胞Bcr-Abl蛋白酪氨酸磷酸化的影响,探讨其抗白血病的分子机制,为As2O3和华蟾素联合应用治疗慢性粒细胞白血病提供理论依据.方法 采用细胞增殖实验检测细胞生长;采用Annexin-V/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染实验、DNA的PI染色及DNA电泳等方法测定细胞凋亡;运用Western blot检测K562细胞Bcr-Abl蛋白酪氨酸磷酸化水平.结果 在As2O3和华蟾素作用下K562细胞生长受抑伴随活力下降,1.0μmol/L As2O3、0.125mg/L华蟾素、0.25mg/L华蟾素、1.0μmol/L As2O3+0.125mg/L华蟾素、1.0μmol/L As2O3+0.25mg/L华蟾素作用K562细胞24h和48h后,增殖抑制率分别为(24±1.3)%、(21±1.5)%、(38±3.1)%、(57±2.7)%、(66±3.3)%及(49±2.9)%、(48±2.7)%、(61±2.1)%、(77±3.8)%、(82±4.2)%,细胞凋亡率分别为(4.8±0.5)%、(5.6±0.7)%、(9.8±0.6)%、(11.9±1.2)%和(15.2±1.5)%及(11.0±0.9)%、(12.9±1.1)%、(18.4±1.5)%、(21.0±2.0)%、(28.0±1.9)%,凋亡细胞百分率呈时间剂量依赖关系;DNA电泳出现"梯"状条带;Bcr-Abl蛋白酪氨酸磷酸化水平出现时间剂量依赖性下调.结论 As2O3和华蟾素能诱导K562细胞凋亡和抑制其增殖,两药联用具有协同作用,机制与下调K562细胞Bcr-Abl蛋白酪氨酸磷酸化有关.

GAO Lu;LIU Yi-xian;GUO Zan;XU Peng;ZHANG Yi