| 酶消化法急性分离大鼠主动脉平滑肌细胞及其鉴定 |
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| 引用本文： | 来利红,王如兴,蒋文平.酶消化法急性分离大鼠主动脉平滑肌细胞及其鉴定[J].苏州大学学报(自然科学版),2008,28(1):23-25. |
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| 作者姓名： | 来利红 王如兴 蒋文平 |
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| 作者单位： | 来利红（苏州大学附属第一医院,心血管病研究室,江苏,苏州,215006）;王如兴（苏州大学附属第一医院,心血管病研究室,江苏,苏州,215006;无锡市第一人民医院,心内科,江苏,无锡,214002）;蒋文平（苏州大学附属第一医院,心血管病研究室,江苏,苏州,215006） |
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| 基金项目： | 江苏省135重点实验室资金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 探讨采用酶消化法快速分离SD大鼠胸、腹主动脉平滑肌细胞的方法,为膜片钳实验提供大量原代平滑肌细胞.方法 取SD大鼠胸、腹主动脉,用酶液Ⅰ(木瓜蛋白酶等)、酶液Ⅱ(胶原酶和透明质酸酶等)酶解分离平滑肌细胞,酶液Ⅰ、Ⅱ的消化时间分别选取10、15、20、25、30 min,并两两组合以确定最佳消化时间.分离的细胞经台盼蓝染色测定其活性并通过平滑肌特异性α-肌动蛋白(α-actin)免疫组化染色鉴定.结果 分离的平滑肌细胞在倒置显微镜下计数,酶液Ⅰ、Ⅱ的消化时间分别在30、15 min时平滑肌细胞数量最多为(18.3 1.5)个/低倍视野,与其他各时间点组合相比,差异有统计学意义(P＜0.05).镜下观察典型的平滑肌细胞呈长梭形,细胞膜完整,边缘光滑;台盼蓝染色,90%以上的细胞为活细胞;免疫组化染色鉴定为平滑肌细胞.结论 酶消化法分离获取SD大鼠平滑肌细胞方法简单、成本低,采用本法可获得较大量的平滑肌细胞供实验使用.
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| 关 键 词： | 大鼠 平滑肌细胞 酶消化法 免疫组化 α-肌动蛋白 酶消化法 急性分离 大鼠主动脉平滑肌细胞 Rats Smooth Muscle Cells Aortic Isolation and Identification 使用 实验 成本 活细胞 边缘 细胞膜 镜下观察 统计学意义 差异 时间点 细胞数量 计数 显微镜下 |
| 文章编号： | 1673-0399(2008)01-0023-03 |
| 修稿时间： | 2007年4月23日 |
The Enzymatic Isolation and Identification of Aortic Smooth Muscle Cells of Sprague Dawley Rats |
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| LAI Li-hong,WANG Ru-xing,JIANG Wen-ping.The Enzymatic Isolation and Identification of Aortic Smooth Muscle Cells of Sprague Dawley Rats[J].Suzhou University Journal of Medical Science,2008,28(1):23-25. |
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| Authors: | LAI Li-hong WANG Ru-xing JIANG Wen-ping |
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| Institution: | LAI Li-hong1,WANG Ru-xing1,2,JIANG Wen-ping1(1.Dept of Cardiology,the First Hospital Affiliated to Suzhou University,Jiangsu Suzhou 215006,China,2.Dept of Cardiology,the First People Hospital of Wuxi City,Jiangsu Wuxi 214002,China) |
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