| 长链非编码RNA-GAS5慢病毒表达载体构建及其转染效率鉴定 |
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| 引用本文： | 郑东颖,侯悦,李媛媛,杨云,乔宠.长链非编码RNA-GAS5慢病毒表达载体构建及其转染效率鉴定[J].临床军医杂志,2019,47(8). |
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| 作者姓名： | 郑东颖 侯悦 李媛媛 杨云 乔宠 |
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| 作者单位： | 大连医科大学附属第二医院 妇产科,辽宁 大连,116000;中国医科大学附属盛京医院 妇产科,辽宁 沈阳,110000 |
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| 基金项目： | 大连市医学科学研究计划项目;盛京自由研究者计划 |
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| 摘 要： | 目的构建长链非编码RNA-GAS5(lncRNA-GAS5)过表达及干扰慢病毒载体,并在人滋养细胞中进行转染效率鉴定。方法获取lncRNA-GAS5基因序列,合成重组lncRNA-GAS5全基因序列,同时设计并合成3条lncRNA-GAS5 RNAi序列,构建过表达及干扰慢病毒载体,转染至293T细胞包装病毒并测定其滴度,转染人滋养细胞株HTR-8/SVneo后,使用荧光显微镜观察荧光表达情况,采用实时定量聚合酶链式反应法检测lncRNA-GAS5表达,并筛选出最佳干扰效率的表达载体。结果过表达载体感染细胞后,其表达量提高了2.12倍;干扰载体感染细胞后,其表达量降低了67.3%。结论本实验成功构建了lncRNA-GAS5慢病毒过表达和干扰载体,可为后续进一步研究提供基础。
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| 关 键 词： | 长链非编码RNA 滋养细胞 慢病毒载体 |
Construction of lentivirus expression vector with long non-coding RNA GAS5 and identification of its transfection efficiency |
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