维甲酸对小型猪牙周膜干细胞成骨诱导能力的比较研究

目的 分离、培养、鉴定小型猪牙周膜干细胞（PDLSCs）并使用不同浓度的维甲酸（RA）对其进行成骨方向诱导，观察各浓度RA诱导后小型猪PDLSCs的碱性磷酸酶活性、相关成骨基因表达的差异。方法 采用组织块法获得小型猪PDLCs，有限稀释法纯化小型猪PDLSCs，免疫荧光法检测STRO-1、免疫细胞化学法检测波形蛋白、角蛋白鉴定小型猪PDLSCs。分别使用0.5μm、1μm、2μm RA对小型猪PDLSCs进行成骨诱导，14 d后行ALP染色，诱导21 d后，茜素红染色检测矿化结节。诱导14 d后对比各组细胞ALP活性。Real-time PCR定量分析各组RA诱导小型猪PDLSCs第21天ALP、OPN、OCN、Col I基因表达情况。结果 纯化后小型猪PDLSCs STRO-1，波形蛋白阳性表达，角蛋白阴性表达，各组RA诱导14 d后，ALP染色阳性，诱导21 d后各诱导组细胞茜素红染色阳性。ALP活性检测显示，小型猪PDLSCs诱导至第14天，ALP活性随RA浓度增高而增高（P<0.001）。Real-time PCR分析成骨相关基因表达结果显示，ALP、OCN基因表达与RA...