| HCMV gp52基因的克隆与表达 |
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| 引用本文： | 方毅,司炳银,张雨,祝庆余. HCMV gp52基因的克隆与表达[J]. 军事医学科学院院刊, 2003, 27(5): 363-366 |
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| 作者姓名： | 方毅 司炳银 张雨 祝庆余 |
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| 作者单位： | 1. 军事医学科学院附属医院,北京,100039
2. 军事医学科学院微生物流行病研究所,北京,100071 |
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| 摘 要： | 目的：克隆表达人巨细胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)gp52基因，制备特异性抗原，用于HCMV早期诊断。方法：从感染的HCMV细胞上清液中提取病毒的DNA，用PCR扩增gp52蛋白IgM抗原决定簇编码区DNA片段，并将其克隆到pGEM-Teasy载体测序，然后将其克隆到含有谷胱甘肽转移酶(GST)融合蛋白表达载体pGEX-5x-3中表达，表达产物经GST亲和层析柱纯化后，采用ELIA和免疫印迹(Westem blotting)检测重组蛋白的抗原性。结果：经序列测定gp52基因片段的序列正确，并在pGDX-5x-3表达载体中得到了高效表达。表达的融合蛋白用亲和层析柱纯化后经免疫印迹和ELISA分析具有良好的抗原性，能够与HCMV IgM阳性血清呈特异性反应。结论：通过基因工程制备的重组gp52蛋白可作为抗原用于HCMV感染者的早期诊断。
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| 关 键 词： | HCMV gp52基因 克隆 表达 聚合酶链反应 |
| 文章编号： | 1000-5501(2003)05-0363-04 |
| 修稿时间： | 2003-03-19 |
Cloning and expression of the gp52 gene of HCMV |
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| FANG Yi ,SI Bing-Yin ,ZHANG Yu ,ZHU Qing-Yu. Cloning and expression of the gp52 gene of HCMV[J]. Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences, 2003, 27(5): 363-366 |
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| Authors: | FANG Yi SI Bing-Yin ZHANG Yu ZHU Qing-Yu |
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| Affiliation: | FANG Yi 2,SI Bing-Yin 1,ZHANG Yu 1,ZHU Qing-Yu 1* |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human cytomegalovirus(HCMV) cloning and expression gp52 ploymerase chain reaction gene expression enzyme-linked immunosorbent assay |
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