肝内血管病变及血管内皮生长因子与乙型肝炎关系的病理学研究

目的研究肝内血管病变及血管内皮生长因子(VEGF)与乙型肝炎(乙肝)的关系.方法选取300例乙肝患者(急性乙肝、慢性乙肝G1～G4及肝硬变患者各50例)肝活检组织及52只SD大鼠(CCl4诱导模型组40只及正常对照组12只)不同时间(2、5、8、12周)肝组织,采用:①动物实验;②肝活检随访观察及体视学分析技术;③组织化学(组化)染色:对肝组织中胶原、网状及弹力纤维进行染色;④免疫组织化学(免疫组化)染色:用纤维连接蛋白(FN)、层连蛋白(LN)、Ⅳ-型胶原(Ⅳ-Co)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及VEGF等单克隆抗体对肝组织进行染色;⑤酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测:定量检测75例乙肝患者血清中VEGF含量.结果①CCl4大鼠实验中,在实验不同时间内,其肝组织肝内血管病变、肝组织病变及VEGF的表达各不相同.早、中期(2～5周),肝组织炎症反应显著,中央静脉周围肝细胞脂肪变,VEGF阳性肝细胞主要分布在脂肪变区域;晚期(8～12周)则肝组织炎症反应轻微,但肝细胞病变显著,血管破坏、血管及成肌纤维细胞增生更趋明显,并见有局部纤维瘢痕形成,假小叶内肝组织肝窦扩张或毛细血管化,其VEGF示阳性.②乙肝肝细胞的变性坏死等与肝内血管病变导致的肝血供障碍密切相关,肝内血管病变主要有血管炎症、血管阻塞、血管破坏、血管增生及肝窦狭窄、阻塞、扩张和肝窦毛细血管化.其贯穿于乙肝的整个病程中并发挥着非常重要的作用.③乙肝肝组织中VEGF的表达及血清中VEGF含量变化与其肝炎分级(G)、分期(S)及血管病变关系密切.在急性乙肝,VEGF呈弥漫性强阳性表达,血清VEGF含量显著升高(P<0.001).在慢性乙肝及肝硬变(LC),其血清VEGF含量并无升高,到LC反而下降(P<0.01),肝组织中VEGF散在表达,以扩张肝窦的内皮细胞及周围肝细胞较显著,其表达在血管形成前期最明显,而在肝血管生成期则逐渐降低.结论肝内血管病变在乙肝的整个病程中发挥着非常重要的作用;VEGF与乙肝肝细胞的再生及肝病变的程度有关,在肝内血管增生及改建中担当一最重要的角色,其在肝组织内增强表达发生于乙肝病变的始发阶段.