| 转甲状腺素蛋白真核表达载体的构建及其细胞内定位 |
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| 引用本文： | 胡水旺,孙明晶,夏高晓,陈丽,赵明哲,姜勇. 转甲状腺素蛋白真核表达载体的构建及其细胞内定位[J]. 解放军医学杂志, 2009, 34(6) |
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| 作者姓名： | 胡水旺 孙明晶 夏高晓 陈丽 赵明哲 姜勇 |
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| 作者单位： | 南方医科大学病理生理学教研室,广东省蛋白质组学重点实验室,广州,510515 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家自然科学基金委员会-广东省人民政府自然科学联合基金重点项目，广州市科技计划，教育部长江学者和创新团队发展计划 |
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| 摘 要： | 目的 构建转甲状腺素蛋白(TTR)的真核表达载体,观察其在NIH 3T3细胞中的表达及定位.方法 提取BALB/c小鼠肝脏组织的总RNA,通过RT-PCR扩增得到TTR编码序列,将该编码序列克隆到带有血凝素(HA)标记的载体pcDNA3-HA上,构建质粒pcDNA3-TTR-HA.重组质粒通过PCR、酶切测序等证明构建正确后经脂质体转染NIH 3T3细胞,固定并染色后通过荧光显微镜观察该融合蛋白的表达及定位.结果 重组质粒经鉴定证明构建正确.转染实验发现,该质粒能够在NIH 3T3细胞中表达,表达产物主要分布在细胞质中.结论 成功构建带HA标签的TTR真核表达载体,该载体能在哺乳动物细胞中有效表达并正确定位,为深入研究TTR在细胞内的相关生物学功能奠定了基础.
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| 关 键 词： | 前白蛋白 克隆,分子 基因表达 |
Construction and intracellular localization of eukaryotic expression vector of transthyretin |
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| HU Shui-wang,SUN Ming-jing,XIA Gao-xiao,CHEN Li,ZHAO Ming-zhe,JIANG Yong. Construction and intracellular localization of eukaryotic expression vector of transthyretin[J]. Medical Journal of Chinese People's Liberation Army, 2009, 34(6) |
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| Authors: | HU Shui-wang SUN Ming-jing XIA Gao-xiao CHEN Li ZHAO Ming-zhe JIANG Yong |
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