| 人二硫键氧化还原酶类似蛋白基因启动子克隆和上游抑制元件分析 |
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| 引用本文： | 陈淑芹,徐宜兰,白宁宁,张菁,方启晨,贾伟平. 人二硫键氧化还原酶类似蛋白基因启动子克隆和上游抑制元件分析[J]. 医学研究杂志, 2016, 45(9): 76-81 |
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| 作者姓名： | 陈淑芹 徐宜兰 白宁宁 张菁 方启晨 贾伟平 |
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| 作者单位： | 200233 上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科、上海市糖尿病重点实验室、上海市糖尿病研究所、上海市糖尿病临床医学中心;200233 上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科、上海市糖尿病重点实验室、上海市糖尿病研究所、上海市糖尿病临床医学中心;200233 上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科、上海市糖尿病重点实验室、上海市糖尿病研究所、上海市糖尿病临床医学中心;200233 上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科、上海市糖尿病重点实验室、上海市糖尿病研究所、上海市糖尿病临床医学中心;200233 上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科、上海市糖尿病重点实验室、上海市糖尿病研究所、上海市糖尿病临床医学中心;200233 上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科、上海市糖尿病重点实验室、上海市糖尿病研究所、上海市糖尿病临床医学中心 |
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| 基金项目： | 上海市自然科学基金资助项目（15ZR1431700） |
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| 摘 要： | 目的 克隆DsbA-L基因启动子，并对其活性进行初步分析。方法 以人基因组DNA为模板，利用PCR技术扩增DsbA-L基因5’端2115bp片段（从翻译起始点ATG上游-2128~-14区域）。将PCR产物插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic。随后，构建5’端系列缺失的报告基因质粒。将构建的一系列质粒转染3T3-L1和HEK 293细胞，检测荧光素酶活性。利用在线软件MAPPER预测转录调控关键序列潜在的转录因子结合位点。通过Real-time PCR比较这些转录因子在肥胖和正常人脂肪组织中的表达。结果 成功构建人DsbA-L启动子报告基因质粒。系列缺失分析表明-2128~-1302区域是影响转录活性的关键序列。MAPPER软件预测此区域可能与一些转录因子结合。比较这些转录因子在肥胖患者和正常人脂肪组织中的表达情况，发现其中NF-κB和FOXO1在肥胖患者中表达显著增加，进一步推测NF-κB和FOXO1可能是人DsbA-L基因启动子上游的调控抑制因子。结论 成功构建人DsbA-L基因启动子系列缺失质粒，初步分析了其上游可能存在的关键调控元件，为进一步的转录调控研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 二硫键氧化还原酶类似蛋白 转录调控 启动子 |
| 收稿时间： | 2016-03-28 |
| 修稿时间： | 2016-04-09 |
Cloning of the Human Disulfide-bond-A oxidoreductase-like Protein Gene Promoter and Identification of the Upstream Repressor |
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| Chen Shuqin,Xu Yilan,Bai Ningning. Cloning of the Human Disulfide-bond-A oxidoreductase-like Protein Gene Promoter and Identification of the Upstream Repressor[J]. Journal of Medical Research, 2016, 45(9): 76-81 |
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| Authors: | Chen Shuqin Xu Yilan Bai Ningning |
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| Affiliation: | Department of Endocrinology and Metabolism, Shanghai Jiaotong University Affiliated Sixth People''s Hospital, Shanghai Key Laboratory of Diabetes Mellitus, Shanghai Diabetes Institute, Shanghai Clinical Center for Diabetes, Shanghai 200233, China;Department of Endocrinology and Metabolism, Shanghai Jiaotong University Affiliated Sixth People''s Hospital, Shanghai Key Laboratory of Diabetes Mellitus, Shanghai Diabetes Institute, Shanghai Clinical Center for Diabetes, Shanghai 200233, China;Department of Endocrinology and Metabolism, Shanghai Jiaotong University Affiliated Sixth People''s Hospital, Shanghai Key Laboratory of Diabetes Mellitus, Shanghai Diabetes Institute, Shanghai Clinical Center for Diabetes, Shanghai 200233, China;Department of Endocrinology and Metabolism, Shanghai Jiaotong University Affiliated Sixth People''s Hospital, Shanghai Key Laboratory of Diabetes Mellitus, Shanghai Diabetes Institute, Shanghai Clinical Center for Diabetes, Shanghai 200233, China;Department of Endocrinology and Metabolism, Shanghai Jiaotong University Affiliated Sixth People''s Hospital, Shanghai Key Laboratory of Diabetes Mellitus, Shanghai Diabetes Institute, Shanghai Clinical Center for Diabetes, Shanghai 200233, China;Department of Endocrinology and Metabolism, Shanghai Jiaotong University Affiliated Sixth People''s Hospital, Shanghai Key Laboratory of Diabetes Mellitus, Shanghai Diabetes Institute, Shanghai Clinical Center for Diabetes, Shanghai 200233, China |
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| Abstract: | |
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