银杏内酯B对H2O2诱导H9C2心肌细胞损伤保护作用研究

目的 研究银杏内酯B（ginkgolide B，GB）对H₂O₂诱导H9C2心肌细胞损伤的保护作用及机制。方法 将对数生长期的H9C2心肌细胞随机分为4组：空白对照、H₂O₂（200μmol/L）干预、GB（100μmol/L）+H₂O₂（200μmol/L）干预、GB（200μmol/L）+H₂O₂（200μmol/L）干预，每组设10个复孔。经药物干预16h后观察各组细胞形态，采用MTT法检测细胞存活率；检测培养液中心肌酶（AST、CPK、LDH）活性；测定细胞中抗氧化酶（SOD、GSH-Px、CAT）活性和丙二醛（MDA）含量；酶联免疫法（ELISA）测定培养液中炎性因子（CRP、TNF-α、IL-1、IL-6）含量水平；采用流氏细胞术检测细胞凋亡状况并计算细胞凋亡率，采用反转录PCR（RT-PCR）技术检测细胞中bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达并计算bcl-2/Bax表达比值，Western blot法检测细胞中NF-κB蛋白表达并进行半定量分析。结果 与H₂O₂干预组比较，GB（100、200μmol/L）+H₂O₂（200μmol/L）干预组细胞培养液中AST、CPK活性和TNF-α、IL-6、CRP、MDA含量均显著降低，SOD、CAT活性显著升高，细胞凋亡率显著降低；bcl-2 mRNA表达显著上调、Bax mRNA表达显著下调，bcl-2/Bax表达比值显著升高，差异均具有统计学意义（P<0.05，P<0.01）；其中GB（200μmol/L）+H₂O₂（200μmol/L）干预组细胞生存状态明显改善、存活率显著升高，LDH活性、IL-1含量以及NF-κB蛋白表达量显著降低，细胞中GSH-Px活性显著升高，差异均具有统计学意义（P<0.05，P<0.01）。结论 GB对H₂O₂诱导损伤H9C2心肌细胞具有保护作用，作用机制可能与GB能够有效改善抗氧化酶活性、抑制氧化应激损伤，上调抑凋亡基因bcl-2表达、下调促凋亡基因Bax表达，提高bcl-2/Bax表达比值，下调NF-κB蛋白表达，降低炎性因子含量相关。

Protective Effects of Ginkgolide B on H9C2 Cardiomyocytes Impared by H2O2 and Its Mechanism