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RNA干扰CTSL表达抑制卵巢癌细胞的侵袭和转移
引用本文:王素梅,李 力,张 玮,黎丹戎,唐步坚.RNA干扰CTSL表达抑制卵巢癌细胞的侵袭和转移[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2010,17(5):525-530.
作者姓名:王素梅  李 力  张 玮  黎丹戎  唐步坚
作者单位:1. 广西医科大学,第一附属医院妇产科,广西,南宁,530021
2. 广西医科大学,附属肿瘤医院,妇瘤科,广西,南宁,530021
基金项目:广西壮族自治区卫生厅资助项目(No. 200614)
摘    要:目的:构建组织蛋白酶L基因(cathepsin L, CTSL)RNAi的真核表达载体,探讨干扰CTSL基因表达对卵巢癌细胞侵袭和转移的影响。方法:设计并合成4对CTSL小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),转染卵巢癌A2780细胞,RT-PCR检测各转染细胞CTSL的表达,筛选沉默效果最好的siRNA序列。设计并合成CTSL-shRNA序列,与psilence4.1-CMV-neo载体连接,构建psilence4.1-CTSL表达载体。psilence4.1-CTSL转染A2780细胞,获得稳定转染克隆A2780-CTSL。RT-PCR和Western blotting验证CTSL基因干扰效果,MTT法和集落形成实验检测A2780细胞的增殖,流式细胞术检测A2780细胞周期,Transwell侵袭小室实验检测A2780细胞体外侵袭和迁移能力。结果:筛选出干扰效果最好的siRNA-CTSL-1202序列,并成功构建相应的CTSL-shRNA表达载体psilence4.1-CTSL。稳定转染psilence4.1-CTSL能沉默A2780细胞中CTSL的表达。沉默CTSL基因后可抑制A2780细胞的侵袭和转移,但不影响A2780细胞的增殖、细胞周期和黏附活性。结论:成功构建CTSL基因siRNA的真核表达载体,RNA干扰CTSL基因表达可抑制卵巢癌细胞的侵袭和转移。

关 键 词:组织蛋白酶L基因(CTSL)  siRNA  卵巢癌  侵袭  转移
收稿时间:2010/7/28 0:00:00
修稿时间:2010/8/30 0:00:00

RNA interfering of CTSL expression inhibits invasion and migration of ovarian cancer cells
WANG Su-mei,LI Li,ZHANG Wei,LI Dan-rong and TANG Bu-jian.RNA interfering of CTSL expression inhibits invasion and migration of ovarian cancer cells[J].Chinese Journal of Cancer Biotherapy,2010,17(5):525-530.
Authors:WANG Su-mei  LI Li  ZHANG Wei  LI Dan-rong and TANG Bu-jian
Abstract:
Keywords:siRNA
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