| 小鼠LIGHT胞外段基因原核表达质粒的构建及表达 |
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| 引用本文： | 张亚丽,江文正,樊燕,钱旻.小鼠LIGHT胞外段基因原核表达质粒的构建及表达[J].免疫学杂志,2008,24(4):389-392. |
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| 作者姓名： | 张亚丽 江文正 樊燕 钱旻 |
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| 作者单位： | 华东师范大学生命科学学院,上海,200062 |
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| 基金项目： | 上海市青年科技启明星计划 |
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| 摘 要： | 目的 构建含有LIGHT胞外段的原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达.方法 从由小鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞中提取总RNA,经RT-PCR扩增LIGHT胞外段,克隆至原核表达载体pEF-24a( )中,构建重组表达质粒pET24-LIGHYECD.重组质粒经酶切鉴定及序列测定后,转化E. coli BL21,IPTG诱导表达,并用SDS-PAGE和Western blot进行检测.结果 RT-PCR扩增出了525 bp LIGHT胞外段的cDNA,经测序证实其序列正确.SDS-PAGE和Western blot分析证实重组质粒可表达出相对分子质量为20 000的LIGHT胞外段蛋白.结论 成功地克隆了小鼠LIGHT胞外段基因并在大肠杆菌中进行了表达,为进一步研究LIGHT的功能打下了基础.
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| 关 键 词： | LIGHT 基因克隆 原核表达 |
Construction and expression of prokaryotic vector encoding extracellular region of murine LIGHT |
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| ZHANG Ya-li,JIANG Wen-zheng,FAN Yan,QIAN Min.Construction and expression of prokaryotic vector encoding extracellular region of murine LIGHT[J].Immunological Journal,2008,24(4):389-392. |
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| Authors: | ZHANG Ya-li JIANG Wen-zheng FAN Yan QIAN Min |
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