| 摘 要： | 目的:探讨温胆汤含药血清在10μmol/ml谷氨酸条件下对星形胶质细胞细胞缝隙连接通讯(gap junctional intercellular communication,GJIC)功能和连接蛋白43(connexin 43,Cx43)表达的影响。方法:将40只清洁级SD大鼠随机分为5组:正常组、氯氮平20 mg/kg组、温胆汤40 g/kg组、温胆汤30 g/kg组、温胆汤20 g/kg组,每组8只。正常组用等量生理盐水ig,氯氮平20 mg/kg组ig氯氮平20 mg/kg,温胆汤40、30、20 g/kg组分别ig温胆汤生药40、30、20 g/kg,1次/d,8天后处死取血,制备含药血清。星形胶质细胞在10μmol/ml谷氨酸条件下经含药血清处理,即10μmol/ml谷氨酸对照组、正常鼠血清组、氯氮平20mg/kg含药血清组、温胆汤40、30g、20 g/kg血清组,处理24、36、48 h后,采用细胞划痕染料标记示踪技术(scrape-loading and dye transfer,SLDT),以荧光染料在细胞间的扩散程度作为评价缝隙连接通讯的指标;Western blotting法检测星形胶质细胞中Cx43磷酸化和非磷酸化的表达。结果:10μmol/ml谷氨酸条件下,星形胶质细胞24h之后细胞凋亡数量明显,36h之后80%以上细胞处于凋亡坏死状态;划痕染料标记示踪技术直接检测GJIC中,温胆汤40、30 g/kg血清组在3个时间段不同程度的明显增加细胞GJIC,温胆汤20 g/kg血清组只在36h时间段增加细胞GJIC;10μmol/ml谷氨酸条件下,温胆汤40 g/kg含药血清使Cx43磷酸化下调和非磷酸化升高。结论:温胆汤含药血清可减少星形胶质细胞的凋亡;促进星形胶质细胞细胞缝隙连接通讯(GJIC);下调星形胶质细胞Cx43磷酸化,升高Cx43非磷酸化程度,从而对细胞缝隙连接通讯功能具有促进作用,这可能与其引起细胞内Cx43的异常活化有关。
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