四跨膜蛋白8对糖尿病肾小管上皮细胞自噬活性的实验研究

目的探讨四跨膜蛋白8(Tspan 8)对糖尿病肾小管上皮细胞自噬活性的影响及机制。方法将HK-2细胞分为正常组(NG,5.5mmol/L D-葡萄糖)和高糖组(HG,30mmol/L D-葡萄糖)。高糖培养的HK-2细胞分别转染Tspan 8基因的随机无靶点阴性对照(shCtrl)和特异性基因敲减序列(siRNA)。Western blot和qPCR检测Tspan 8表达;Western blot检测蛋白激酶B(Akt)及其磷酸化水平(p-Akt),哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及其磷酸化水平(Ⅱ/Ⅰ)。结果高糖刺激后,Tspan 8表达升高约1.5倍(P0.01);与shCtrl组比较,Tspan 8siRNA组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高3倍,p-Akt表达降低约1.5倍,p-mTOR表达降低约2倍(P0.01)。结论 Tspan8可能通过激活mTOR信号通路,负向调节糖尿病肾小管上皮细胞的自噬活性。