| 摘 要： | 目的:探讨组织蛋白酶S抑制剂(Cat S-I)影响小鼠缺血诱导的血管新生的机制。方法:将8周龄野生型小鼠(C57/BL6)随机分为两组:对照组(n=20)采用基础饲料饲养基础上再注射5%羧甲基纤维素钠盐,Cat S-I组(n=20)在基础饲料饲养基础上再注射Cat S-I[1 mg/(kg·d)],分别每天1次,共17天。腹腔注射3天后建立下肢缺血模型。用激光多普勒超声血流仪检测下肢血流,计算缺血肢与非缺血肢血流面积比;术后第4天利用免疫蛋白印迹(Western)法检测过氧化物酶增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化内皮型一氧化氮合酶(p-e NOS)和血管内皮生长因子(VEGF)等蛋白水平;术后第7天,取缺血骨骼肌作冰冻切片,采用免疫组织化学方法测定毛细血管密度。结果:(1)Cat S-I明显抑制下肢血流的恢复。缺血与非缺血下肢血流比值统计结果显示:Cat S-I组小鼠缺血下肢血流恢复明显慢于对照组(P0.05)。(2)Cat S-I组明显抑制毛细血管的形成。术后第14天非缺血骨骼肌中,与对照组比较,Cat S-I组毛细血管形成略减少,但差异无统计学意义(P0.05);但在缺血骨骼肌中,Cat S-I组小鼠的毛细血管密度明显低于对照组(P0.01)。(3)免疫蛋白印迹法检测结果表明,Cat S-I组小鼠中,PPAR-γ、p-Akt、p-e NOS和VEGF等蛋白表达水平与对照组比较明显减少(P0.05)。结论:Cat S-I调控缺血性血管新生可能与PPAR-γ激活及磷脂酰肌醇激酶(PI3K)/Akt/e NOS信号通路有关。
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