摘 要: | 目的探讨miR-328对高糖诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)间质转化的调控作用。方法构建miR-328和antagomiR-328慢病毒,培养HUVECs分为正常对照组(NC)、甘露醇对照组(MT)、高浓度葡萄糖组(HG),miR-328、miR-328阴性组、高浓度葡萄糖+antagomiR-328组、高浓度葡萄糖+antagomiR-328阴性组共7组。免疫荧光鉴定HUVECs间质转化;qRT-PCR检测miR-328;Western blot检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白。结果高糖处理HUVECs呈CD31、α-SMA双阳性;HG组较NC组miR-328表达增高[(2.800±0.175)vs 1,P0.05];HG组及miR-328组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白较NC组表达增加[(0.414±0.014)vs(0.403±0.016)vs(0.175±0.025),(0.501±0.014)vs(0.474±0.016)vs(0.185±0.014),P0.05];antagomiR-328组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白较HG组表达减少[(0.227±0.012)vs(0.414±0.014),(0.222±0.015)vs(0.501±0.014),P0.05]。结论高糖诱导HUVECs间质转化,miR-328表达增加;过表达miR-328诱导HUVECs间质转化,并具有相应分泌功能,而过表达antagomiR-328可抑制这一现象。
|