| 大鼠Aggrecanse-1，2特异性shRNA慢病毒表达载体的构建及测序 |
| |
| 引用本文： | 王正辉,杨壮群,贺西京,李国光,王丽,李丽霞,屠军波.大鼠Aggrecanse-1，2特异性shRNA慢病毒表达载体的构建及测序[J].中国美容医学,2007,16(12):1679-1682. |
| |
| 作者姓名： | 王正辉 杨壮群 贺西京 李国光 王丽 李丽霞 屠军波 |
| |
| 作者单位： | 1. 西安交通大学口腔医院口腔颌面整形外科,陕西,西安,710004
2. 西安交通大学第二医院骨科,陕西,西安,710004 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金;陕西省国际合作项目 |
| |
| 摘 要： | 目的：利用RNA干扰技术，以大鼠aggrecanse-1，2基因为靶基因，设计aggrecanse-1，2基因特异性的小干扰RNA（siRNA），构建其短发夹RNA（shRNA）重组慢病毒表达载体，并进行测序鉴定。方法：根据Tuschl原则设计并合成大鼠aggrecanse-1，2基因特异性的DNA寡核苷酸，连接到经BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切线性化的pKCSHR-GFP质粒上，转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，筛选阳性菌落、扩增后提取质粒，进行DNA测序鉴定。结果：将合成的8对大鼠aggrecanse-1，2基因特异性DNA寡核苷酸序列退火后，分别克隆到线性化的pKCSHR-GFP载体质粒上。在氨苄青霉素培养基条件下，筛选出相应的阳性菌落，经DNA测序鉴定确定为设计的序列。结论：成功构建了8对大鼠aggrecanse-1，2基因特异性shRNA重组慢病毒表达载体，可进一步用于干扰aggrecanse-1，2基因的mRNA转录，从而为制备aggrecanse-1，2基因表达受抑制的大鼠软骨细胞奠定基础。
|
| 关 键 词： | RNA干扰 慢病毒载体 多聚蛋白聚糖酶-1 2 |
| 文章编号： | 1008-6455（2007）12-1679-04 |
| 收稿时间： | 2007-09-11 |
| 修稿时间： | 2007-11-27 |
Construction and sequencing of recombinant lentiviral plasmid affecting rattus aggrecanse 1,2 gene by RNA interfering |
| |
| WANG Zheng-hui,YANG Zhuang-qun,HE Xi-jing,LI Guo-guang,WANG li,LI Li-xia,TU Jun-bo.Construction and sequencing of recombinant lentiviral plasmid affecting rattus aggrecanse 1,2 gene by RNA interfering[J].Chinese Journal of Aesthetic Medicine,2007,16(12):1679-1682. |
| |
| Authors: | WANG Zheng-hui YANG Zhuang-qun HE Xi-jing LI Guo-guang WANG li LI Li-xia TU Jun-bo |
| |
| Institution: | WANG Zheng-hui,YANG Zhuang-qun, HE Xi-jing, LI Guo-guang, WANG li,LI Li-xia,TU Jun-bo (1.Department of Oral and Maxillofacial Plastic Surgery, Stomatological Hospital, Xi＇an Jiaotong University, Xi＇an 710004 Shaanxi, China; 2.Department of Orthopaedics, the Second Hospital, Xi＇an Jiaotong University, Xi＇an 710004,Shaanxi, China) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | RNA interference lentiviral vector aggrecanse-1 2 |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
