| 用于PCR实验的毕赤酵母基因组DNA制备方法的比较 |
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| 引用本文： | 剧海,梁东春,郭刚,张镜宇.用于PCR实验的毕赤酵母基因组DNA制备方法的比较[J].天津医药,2003,31(5):270-272. |
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| 作者姓名： | 剧海 梁东春 郭刚 张镜宇 |
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| 作者单位： | 300070,天津医科大学内分泌所生化与分子生物学研究室 |
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| 基金项目： | 天津市自然科学基金重点项目 (项目编号 :023608711) |
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| 摘 要： | 目的：比较4种用于PCR实验的毕赤酵母基因组DNA的制备方法，以寻求一种稳定、简便的DNA模板制备方法，用于毕赤酵母重组子的分析。方法：分别用玻璃珠法、煮沸法、煮—冻—煮法以及直接法制备毕赤酵母基因组DNA模板，在相同条件下进行PCR扩增并比较其差异。结果：煮—冻—煮法与玻璃珠法制备的模板进行PCR均可取得理想的实验结果。以煮沸法制备模板作PCR时结果受所用模板浓度的影内很大，稳定性较差。直接法(即直接用未经处理的菌体作模板)的PCR结果随机性较大，实验结果最不理想。结论：煮—冻—煮法所需时间少、费用低、操作简便而且结果稳定，是采用毕赤酵母表达系统进行PCR鉴定时制备模板DNA的首选方法。
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| 关 键 词： | 毕赤酵母 基因组 DNA 制备方法 聚合酶链反应 |
Comparison of Four Methods to Prepare Pichia Genomic DNA for PCR |
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| JU Hai,LIANG Dongchun,GUO Gang,ZHANG Jingyu Institute of Endocrinology,Tianjin Medical University,Tianjin,China.Comparison of Four Methods to Prepare Pichia Genomic DNA for PCR[J].Tianjin Medical Journal,2003,31(5):270-272. |
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| Authors: | JU Hai LIANG Dongchun GUO Gang ZHANG Jingyu Institute of Endocrinology Tianjin Medical University Tianjin China |
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| Institution: | JU Hai,LIANG Dongchun,GUO Gang,ZHANG Jingyu Institute of Endocrinology,Tianjin Medical University,Tianjin300070,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | pichia DNA polymerase chain reaction |
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