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| 抗人CD154单抗轻重链可变区基因克隆与序列分析 | |
| 引用本文： | 张春艳,张志方,李树浓,宁波,陈琼玲. 抗人CD154单抗轻重链可变区基因克隆与序列分析[J]. 中国病理生理杂志, 2002, 18(11): 1381-1385 |
| 作者姓名： | 张春艳 张志方 李树浓 宁波 陈琼玲 |
| 作者单位： | 1. 中山大学中山医学院, 免疫学教研室, 广东广州510089; 2. 中山大学中山医学院, 生理学教研室, 广东广州510089; 3. 中山大学中山医学院, 病理生理学教研室, 广东广州510089 |
| 摘 要： | 目的:克隆抗人CD154抗体轻重链可变区基因,并分析其核苷酸序列,为基因工程抗体的构建奠定基础。方法:从分泌能抑制免疫反应的抗人CD154单克隆抗体杂交瘤细胞株 7E8中提取总RNA,合成cDNA第一链后,经PCR扩增获得抗人CD154单抗轻链可变区 (VL)和重链可变区 (VH)基因,分别克隆入pUC18载体,并进行序列分析。结果:①抗体的轻链可变区基因全长为 341bp,编码113个氨基酸,归属于Ig的Vκ2基因,氨基酸序列分析结果显示轻链可变区含有明确的 4个骨架区和 3个抗原决定簇互补区,在第 2 3位和第 93位氨基酸为半胱氨酸,是与抗体二硫键形成有关的两个特征性氨基酸;②抗体的重链可变区基因全长为 354bp,编码118个氨基酸,归属于小鼠IgVH基因,D、J区基因分别属于DSP2.9和JH2,氨基酸序列分析结果显示,重链可变区含有明确的 4个骨架区和 3个抗原决定簇互补区,在第 2 3和第 97位氨基酸为半胱氨酸,是与抗体二硫键形成有关的两个特征性氨基酸。结论:经核苷酸序列分析证明所克隆的基因分别为抗体的轻、重链可变区基因. |
| 关 键 词： | CD40配体 可变区基因 碱基序列分析 基因克隆 |
| 文章编号： | 1000-4718(2002)11-1381-05 |
| 收稿时间： | 2002-01-05 |
| 修稿时间： | 2002-01-05 |
Cloning and sequencing of the VL and VH genes from the anti-hCD154 McAb hybridoma cell line |
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| ZHANG Chun-yan ,ZHANG Zhi-fang ,LI Shu-nong ,NING Bo ,CHEN Qiong-ling. Cloning and sequencing of the VL and VH genes from the anti-hCD154 McAb hybridoma cell line[J]. Chinese Journal of Pathophysiology, 2002, 18(11): 1381-1385 | |
| Authors: | ZHANG Chun-yan ZHANG Zhi-fang LI Shu-nong NING Bo CHEN Qiong-ling |
| Affiliation: | 1. Department of Immunology, Zhongshan Medical School, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510089, China; 2. Department of Physiology, Zhongshan Medical School, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510089, China; 3. Department of Pathophysiology, Zhongshan Medical School, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510089, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | CD40 ligand Variable region gene Base sequence analyses Gene clone |
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