用分段Percoll密度梯度法分纯人体T细胞和B细胞

作者报导了一种分离人体外周血中T细胞和B细胞的简单技术。此法是基于细胞在间断的Percoll密度梯度中有不同的移动度而进行的。Percoll是一种新的密度梯度分离液,是由聚乙烯吡咯烷酮包被的胶状硅组成(瑞典Uppsala产)。9份Percoll(比重为1130克/毫升)与1份10倍浓度的PBS混和(100%Percoll浓度),进一步以PBS(正常浓度)稀释成70%、60%、50%和40%的Per coll浓度备用。先以F-H梯度法分离得人外周血单核的细胞,使细胞在含有10%脱补体的胎牛血清的199培养液中保持一定浓度(不超过80×10~6/毫升),置于容量为12毫升的塑料试管中离心,弃去上清后,将每一种不同浓度的Percoll溶液(开始用100%,继而用70%,60%……依次递减)2毫升铺在细胞团