骨髓间充质干细胞的体外趋化与单核细胞趋化蛋白1的作用

目的：观察单核细胞趋化蛋白1对骨髓问充质干细胞体外增殖和迁移的作用，及单核细胞趋化蛋白1抗体对该作用的影响。方法：实验于2003—12／2004一02在军事医学科学院野战输血研究所干细胞生物实验室完成。取10只健康雄性Wistar大鼠骨髓，体外分离、培养骨髓间充质干细胞，选择第2代作为实验细胞。观察0，5，25，50，75，150μg／L单核细胞趋化蛋白1对大鼠骨髓间充质干细胞的生物学作用；通过细胞迁移实验，观察0，5，25，50，75，150μg／L单核细胞趋化蛋白1对骨髓间充质干细胞的体外趋化作用，以及加入单核细胞趋化蛋白1抗体中和后其对骨髓间充质干细胞趋化作用的变化；应用反转录多聚酶链反应方法，检测大鼠骨髓间充质干细胞有无单核细胞趋化蛋白1相关受体细胞趋化因子受体2的表达。结果：①二甲基偶氮唑盐法测定细胞增殖实验结果：在体外，单核细胞趋化蛋白1以浓度梯度（0，5，25，50，75，150μg／L)依赖方式促进大鼠骨髓间充质干细胞的增殖，但作用较温和。②细胞迁移实验结果：单核细胞趋化蛋白1以浓度梯度（0，5，25，50，75，150μg／L)依赖方式促进大鼠骨髓骨髓间充质干细胞的定向迁移，该作用显著（P&;lt;0．05)。③抗体中和后的迁移实验：75μg／L质量浓度单核细胞趋化蛋白1对骨髓间充质干细胞的促迁移作用可被单核细胞趋化蛋白1中和抗体明显减弱（P&;lt;0．05)。④反转录聚合酶链反应方法证实骨髓间充质干细胞表达单核细胞趋化蛋白1的相关受体细胞趋化因子受体2。结论：在体外，单核细胞趋化蛋白1以浓度梯度依赖方式引起骨髓间充质干细胞的定向迁移，而且该作用可被单核细胞趋化蛋白1中和抗体减弱。单核细胞趋化蛋白1可能通过与细胞趋化因子受体2结合后发挥作用。本实验为了将影响因素相对简单化，便于观察其中的相互关系，并非将体外实验结果完全等同于在体情况。