| 小鼠CD4、CD8膜外区编码cDNA的克隆与表达 |
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| 引用本文： | 王海萍,赵丽,王健伟,贾友苏,韩金祥,洪涛. 小鼠CD4、CD8膜外区编码cDNA的克隆与表达[J]. 安徽医科大学学报, 2005, 40(1): 1-4 |
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| 作者姓名： | 王海萍 赵丽 王健伟 贾友苏 韩金祥 洪涛 |
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| 作者单位： | 安徽医科大学组胚教研室,合肥,230032;山东省病毒学研究所/山东省医学病毒学重点实验室暨卫生部生物技术药物重点实验室,济南,250062;中国疾病预防控制中心病毒预防控制所,北京,100052;山东大学医学院,济南,250062;山东省病毒学研究所/山东省医学病毒学重点实验室暨卫生部生物技术药物重点实验室,济南,250062;中国疾病预防控制中心病毒预防控制所,北京,100052;安徽医科大学组胚教研室,合肥,230032;山东省病毒学研究所/山东省医学病毒学重点实验室暨卫生部生物技术药物重点实验室,济南,250062 |
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| 基金项目： | 国家 863计划生物现代农业技术领域资助项目 (编号:2003AA215071) |
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| 摘 要： | 目的 克隆并表达小鼠CD4和CD8基因，以期制备其抗体为疫苗研究服务。方法 从小鼠脾细胞中提取总RNA，利用RT-PCR技术克隆CD4、CD8α和CD8β膜外区片段的编码cDNA，利用谷光苷肽硫基转移酶(GST)融合表-达载体pCEX-CS对其进行表达，利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot对重组蛋白进行鉴定。结果 以小鼠脾细胞总RNA为模板，分别扩增出小鼠CD4、CD8α和CD8β膜外区片段的编码cDNA，将其插入表达载体pGEX-CS，得到重组质粒pGEX-CSCD4、pGEX-CSCD8α和pGEX-CSCD8β。将所获表达载体转化E．coli BL21，用IPTG诱导表达，SDS-PAGE检测表明小鼠CD4、CD8α、CD8β片段均得到成功表达，其表达量町占菌体蛋白总量的30%左右，且均可与抗GST抗体反应。结论 成功克隆、表达了小鼠CD4、CD8α和CD8β，为进一步制备抗体从而用于免疫学研究打下了基础。
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| 关 键 词： | 抗原 CD4 CD8 逆转录聚合酶链反应 |
| 文章编号： | 1000-1492(2005)01-0001-04 |
| 修稿时间： | 2004-07-22 |
Cloning and expression of the cDNAs encoding the ectodomain of mouse CD4 and CD8 |
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| Wang Haiping,Zhao Li,Wang Jianwei et al. Cloning and expression of the cDNAs encoding the ectodomain of mouse CD4 and CD8[J]. Acta Universitis Medicinalis Anhui, 2005, 40(1): 1-4 |
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| Authors: | Wang Haiping Zhao Li Wang Jianwei et al |
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