| 重组蛋白酶抑制蛋白拮抗中性粒细胞释放炎性介质的作用 |
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| 引用本文： | 胡毓华,朱亮华,陆超. 重组蛋白酶抑制蛋白拮抗中性粒细胞释放炎性介质的作用[J]. 实用儿科临床杂志, 2012, 27(10): 760-762 |
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| 作者姓名： | 胡毓华 朱亮华 陆超 |
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| 作者单位： | 南京医科大学第一附属医院儿科,南京,210029 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，江苏省卫生厅医学科技发展基金 |
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| 摘 要： | 目的克隆分泌型白细胞蛋白酶抑制(SLPI)蛋白基因并表达人SLPI重组蛋白,探讨其拮抗中性粒细胞释放炎性介质的作用。方法抽提人外周血中性粒细胞mRNA,克隆SLPI基因,构建质粒,转染后抽提纯化蛋白,实验分组后,分别进行不同剂量的SLPI和内毒素(LPS)共处理中性粒细胞。A组:正常对照组(不予LPS和重组SLPI蛋白处理);B组:LPS处理组(加终质量浓度0.001 g·L-1的LPS);C组:低剂量重组SLPI蛋白干预组(加重组SLPI蛋白0.010 g·L-1和终质量浓度0.001 g·L-1的LPS);D组:中剂量重组SLPI蛋白干预组(加重组SLPI蛋白0.050 g·L-1和终质量浓度0.001 g·L-1的LPS);E组:高剂量重组SLPI蛋白干预组(加重组SLPI蛋白0.100 g·L-1和终质量浓度0.001 g·L-1的LPS)。然后进行中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)活性实验、炎性介质释放实验以及转录因子STAT3活性实验,分别测定NE活性、炎性介质IL-6/IL-8表达量及转录因子STAT3的DNA结合活性。结果成功构建SLPI基因全长cDNA的真核表达载体,发现重组SLPI蛋白呈剂量依赖性地抑制LPS诱导的NE活性[(17.78±0.54)nmol·L-1vs(5.46±0.12)nmol·L-1,P<0.05]。重组SLPI蛋白也显著抑制LPS诱导的炎性介质IL-6[(179.51±6.61)ng·L-1vs(63.13±4.55)ng·L-1,P<0.05]和IL-8[(192.98±7.65)ng·L-1 vs(103.42±4.76)ng·L-1,P<0.05]的释放及转录因子STAT3的DNA结合力升高。结论 SLPI可有效抑制NE活性,减轻炎性损伤。
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| 关 键 词： | 分泌型白细胞蛋白酶抑制蛋白 弹性蛋白酶 炎性介质 转录因子 |
Role of Recombination Protein of Secretory Leukocyte Protease Inhibitor Suppressing the Release of Inflammatory Mediators from Ncutrophilic Leukocyte |
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| HU Yu-hua , ZHU Liang-hua , LU Chao. Role of Recombination Protein of Secretory Leukocyte Protease Inhibitor Suppressing the Release of Inflammatory Mediators from Ncutrophilic Leukocyte[J]. Journal of Applied Clinical Pediatrics, 2012, 27(10): 760-762 |
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| Authors: | HU Yu-hua ZHU Liang-hua LU Chao |
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| Affiliation: | (Department of Pediatrics,the First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University,Nanjing 210029,Jiangsu Province,China) |
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