电刺激干预大鼠背根神经节神经元细胞模型的构建

目的:探索微电流影响背根神经节(DRG)细胞神经元生长的机制,为三维支架材料应用于人工脊髓及电刺激治疗脊髓损伤提供科学依据。方法:选取大鼠DRG神经元为研究对象,在其生长过程中引入电刺激,从双相(BI)/单相(MO)、刺激时间、刺激电压、刺激频率这4个方面对神经元进行电刺激干预,免疫荧光鉴定神经元并计数神经元纯度,显微镜和扫描电镜下观察细胞形态。结果:显微镜和免疫荧光均鉴定出本研究成功分离DRG神经元,纯度高达(91±6)%;扫描电镜观察到细胞生长状况良好。经不同刺激条件干预后的细胞经显微镜观察发现,6 V·cm~(-1)直流电刺激刺激30 min的细胞存活量最多,形成的神经网络最为致密。结论:6 V·cm~(-1)直流电刺激刺激30 min的条件干预最为合适构建研究模型,为后续人工脊髓的研究提供可靠的实验模型。