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南海红树林来源链霉菌Streptomyces sp. OUC6819遗传操作系统的建立
引用本文:刘增智,李通,刘晶,姚婷婷,张慧,夏娟,李花月,车茜,李文利.南海红树林来源链霉菌Streptomyces sp. OUC6819遗传操作系统的建立[J].中国海洋药物,2016,35(4):53-59.
作者姓名:刘增智  李通  刘晶  姚婷婷  张慧  夏娟  李花月  车茜  李文利
作者单位:教育部海洋药物重点实验室,教育部海洋药物重点实验室,教育部海洋药物重点实验室,教育部海洋药物重点实验室,教育部海洋药物重点实验室,教育部海洋药物重点实验室,教育部海洋药物重点实验室,教育部海洋药物重点实验室,教育部海洋药物重点实验室
基金项目:国家自然科学基金项目(面上项目,重点项目,重大项目)
摘    要:摘 要: 目的 建立南海红树林来源链霉菌Streptomyces sp. OUC6819菌株的遗传转化系统,通过基因阻断方法来研究次级代谢产物的生物合成途径。方法 分别以整合型载体pSET152和用于同源重组的、包含可能参与大环多烯类化合物生物合成的DNA片段的非复制型cosmid质粒,通过大肠杆菌—链霉菌属间接合转移导入Streptomyces sp. OUC6819之中。结果 通过在接合转移过程中对菌丝体进行超声破碎,成功获得了正确的接合子。采用PCR方法验证了pSET152的导入和目标基因orf1的阻断,进一步对突变株的发酵产物进行了HPLC分析,结果显示突变株丧失了合成大环多烯类化合物的能力。结论 成功建立了基于菌丝体超声破碎的海洋链霉菌遗传转化系统,为对其它基因进行遗传学操作奠定了基础,也为其它不便进行遗传操作的链霉菌提供了参考。

关 键 词:Streptomyces  sp.  OUC6819  PKSs    PCR-targeting  接合转移  基因敲除
收稿时间:2015/12/17 0:00:00
修稿时间:2016/1/12 0:00:00

Development of the genetic system of mangrove-derived Streptomyces sp. OUC6819
LIU Zengzhi,and.Development of the genetic system of mangrove-derived Streptomyces sp. OUC6819[J].Chinese Journal of Marine Drugs,2016,35(4):53-59.
Authors:LIU Zengzhi  and
Abstract:
Keywords:Streptomyces sp  OUC6819  PKSs  PCR-targeting  intergeneric conjugation  gene knockout
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