| Cdc2基因敲低逆转录病毒载体设计与构建方法 |
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| 引用本文： | 程序曲,王金鹏,黄强,王爱东,董军,兰青.Cdc2基因敲低逆转录病毒载体设计与构建方法[J].中国微侵袭神经外科杂志,2005,10(6):256-259. |
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| 作者姓名： | 程序曲 王金鹏 黄强 王爱东 董军 兰青 |
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| 作者单位： | 苏州大学附属第二医院神经外科暨脑肿瘤研究室,苏州,215004 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30371457)，江苏省高等学校研究生创新计划(50320026) |
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| 摘 要： | 目的设计和构建cdc2基因敲低的表达siRNA的逆转录病毒重组载体。方法利用在线软件siRNASelectionProgram和siDirect设计干扰cdc2基因靶序列,合成回文DNA序列,退火后克隆至线性化pSUPER质粒载体,重组质粒载体扩增、抽提后行双酶切电泳鉴定和测序分析,再转染phoenix细胞,产生逆转录病毒,并利用NIH3T3细胞测定病毒滴度。结果pSUPER表达siRNA重组质粒载体经双酶切电泳鉴定和DNA测序分析,证实插入的60bp序列与原序列一致,位置正确。pSUPER.retro-C1、pSUPER.retro-C2病毒滴度值分别为4.25×105CFU/ml和6.00×105CFU/ml。结论cdc2基因表达siRNA逆转录病毒重组载体构建成功,可为研究胶质瘤分子病因学提供有用工具。
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| 关 键 词： | RNA干扰 基因 cdc2蛋白激酶 逆转录病毒载体 基因沉默 神经胶质瘤 |
| 文章编号： | 1009-122X(2005)06-0256-04 |
| 修稿时间： | 2005年1月24日 |
Design and construction of recombinant retrovirus vector for cdc2 gene knockdown |
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| CHENG Xuqu,Wang Jinpeng,HUANG Qiang,et al.Design and construction of recombinant retrovirus vector for cdc2 gene knockdown[J].Chinese Journal of Minimally Invasive Neurosurgery,2005,10(6):256-259. |
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| Authors: | CHENG Xuqu Wang Jinpeng HUANG Qiang |
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| Institution: | CHENG Xuqu,Wang Jinpeng,HUANG Qiang,et alDepartment of Neurosurgery,Brain Tumor Research Laboratory,Second Hospital of Soochow University,Suzhou 215004,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RNA interference CDC2 protein kinase retroviral vector gene silencing glioma |
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