邻苯二甲酸酯对软骨细胞凋亡及超微结构的影响

目的:通过研究塑化剂邻苯二甲酸酯对软骨细胞凋亡因子bcl-2和Bax蛋白表达及超微结构的影响,探讨邻苯二甲酸酯在致软骨细胞凋亡中的作用机制。方法:用软骨细胞体外培养的方法,原代培养乳鼠关节软骨细胞,传第3代后加药,按染邻苯二甲酸酯剂量不同分为0/L(对照)、10-10/L、10-8/L、10-6/L组,染邻苯二甲酸酯培养7 d后,透射电镜下观察软骨细胞的超微结构改变,采用western-blot方法检测各实验组中软骨细胞bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:透射电镜下对照组和10-10/L组的软骨细胞呈球形,粗面内质网发达,线粒体膜性结构完整;10-8/L、10-6/L组的细胞内可见脂滴明显增多,胞质内出现大量空泡类物质,细胞内膜结构不清,部分细胞出现核固缩。10-8/L、10-6/L组的软骨细胞bcl-2的蛋白表达(0.620±0.041和0.530±0.035)较对照组表达(0.805±0.032)显著降低(P<0.01);而Bax的表达(0.966±0.038和1.280±0.154)较对照组表达(0.602±0.045)显著增加(P<0.01)。10-10/L组软骨细胞中bcl-2的表达(0.878±0.055)和Bax的表达(0.650±0.039)与对照组相比均无统计学差异(P>0.05)。此外,10-8/L、10-6/L组相比,bcl-2和Bax的表达也有显著差异(P<0.01)。结论:10-8/L、10-6/L浓度的邻苯二甲酸酯可对软骨细胞超微结构造成损伤,其通过减少抑凋亡因子bcl-2的表达和增加促凋亡因子Bax的表达,从而产生促进软骨细胞凋亡的作用。

Impact of phthalic acid esters on the apoptosis and ultrastructure modification of chondrocytes