登革病毒外膜蛋白DⅢ区融合基因真核表达载体的构建及免疫效果研究 |
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作者姓名: | 张志珊 严延生 翁育伟 黄海龙 何似 |
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作者单位: | 1. 福建医科大学附属泉州第一医院检验科,泉州,362000 2. 福建省疾病预防控制中心,福州,362000 |
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摘 要: | 目的:构建登革病毒外膜蛋白DⅢ区融合基因真核表达载体并分析其免疫原性.方法:利用连接肽将登革病毒1型与2型、3型与4型的外膜蛋白(E蛋白)DⅢ基因片段连接在一起,克隆人真核表达载体pCDNA3.1(+),构建DEN1/2型、DEN3/4型EDⅢ融合基因的二价真核表达载体,转染哺乳动物细胞BHK-21,用间接免疫荧光法和免疫印迹法鉴定目的蛋白的表达.将两种二价重组质粒混合形成四价DNA疫苗免疫小鼠,观察其免疫原性及诱导产生中和抗体的能力.结果:二价重组质粒能在BHK-21细胞中表达目的蛋白,四价DNA质粒免疫小鼠,能诱导产生针对登革病毒1~4型的中和抗体,平均中和效价分别为l:24.7、1:26.9、1:13.4、1:16.0.结论:本研究构建的DNA质粒在小鼠模型中具有良好的免疫原性,为登革多价DNA疫苗的研究提供了可行性.
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关 键 词: | 登革病毒 DNA疫苗 外膜蛋白 免疫原性 |
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