| 靶向人端粒酶逆转录酶小片段干涉RNA表达载体的构建和表达 |
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| 引用本文： | 赵鹏,郭永智,傅震,尤永平,陈云祥,陆小明,鲁艾林,刘宁,孙天胜,朱兵.靶向人端粒酶逆转录酶小片段干涉RNA表达载体的构建和表达[J].中华神经医学杂志,2007,6(3):265-269. |
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| 作者姓名： | 赵鹏 郭永智 傅震 尤永平 陈云祥 陆小明 鲁艾林 刘宁 孙天胜 朱兵 |
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| 作者单位： | 1. 210029,南京,南京医科大学附属第一医院神经外科
2. 100700,北京,北京军区总医院骨科中心 |
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| 摘 要： | 目的构建靶向人端粒酶逆转录酶（hTERT）的小片段RNA（siRNA）表达载体，为研究RNA干涉（RNAi）在哺乳动物细胞内抑制靶基因表达奠定基础。方法根据siRNA靶点设计的原则运用相关软件设计靶序列并合成其表达框，连接人质粒载体pRNAT-H1．1／Neo，转染293T细胞，荧光定量RT．PCR和Western blot法检测转染后293T细胞中hTERT表达。结果重组质粒经测序鉴定证明hTERTsiRNA转录模板完整、正确插入到pRNAT．H1．1／Neo质粒中，并筛选出一个抑制hTERT表达效率最高的序列，其hTERT表达仅达22．90％。结论利用基因重组和荧光定量PCR等技术能成功构建并筛选出一个抑制效率最好的靶向hTERT的siRNA表达载体，为以hTERT为靶点的肿瘤基因治疗的后续研究奠定基础。
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| 关 键 词： | 人端粒酶逆转录酶 RNA干涉 DNA表达载体 |
| 文章编号： | 1671-8925（2007）03-265-005 |
| 收稿时间： | 2006-09-19 |
Construction of siRNA expression vector targeting hTERT and its expression in 293T cell |
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| ZHAO Peng,GUO Yong-zhi,FU Zheng,YOU Yong-ping,CHEN Yun-xiang,LU Xiao-ming,LU Ai-lin,LIU Ning,SUN Tian-sheng,ZHU Bing.Construction of siRNA expression vector targeting hTERT and its expression in 293T cell[J].Chinese Journal of Neuromedicine,2007,6(3):265-269. |
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| Authors: | ZHAO Peng GUO Yong-zhi FU Zheng YOU Yong-ping CHEN Yun-xiang LU Xiao-ming LU Ai-lin LIU Ning SUN Tian-sheng ZHU Bing |
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| Keywords: | hTERT RNAi DNA expression vector |
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