促红细胞生成素对血管紧张素Ⅱ诱导的系膜细胞增殖及Ⅰ/Ⅳ型胶原和纤维连接蛋白表达的影响研究

目的 探讨促红细胞生成素（EPO）对血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）诱导的系膜细胞增殖及Ⅰ型胶原（ColⅠ）、Ⅳ型胶原（Col Ⅳ）和纤维连接蛋白（FN）表达的影响。方法 将体外培养大鼠肾小球系膜细胞分为4组：对照组，AngⅡ组（0.1、1.0、10.0 μmol/L），EPO组（1、10、100 U/L），AngⅡ+EPO组（EPO 1、10、100 U/L预处理1 h后加AngⅡ 1.0 μmol/L）。各组处理0、24、48 h时，CCK-8法检测系膜细胞增殖情况，免疫印迹法检测系膜细胞ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白表达水平，ELISA法检测系膜细胞培养上清液中ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白水平。结果 单独给予AngⅡ或EPO均可刺激系膜细胞增殖，AngⅡ组亚组和EPO组亚组24、48 h时系膜细胞增殖水平均高于对照组，且48 h时高于24 h时，24 h时高于0 h时，差异均有统计学意义（P＜0.05）；单独给予AngⅡ或EPO均可促进系膜细胞合成及分泌ColⅠ、Col Ⅳ和FN，除EPO 1 U/L亚组Col Ⅰ蛋白表达水平与对照组间差异无统计学意义（P＞0.05）外，AngⅡ组亚组和EPO组其他亚组ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白表达水平均高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。与AngⅡ1.0 μmol/L+EPO 1 U/L亚组比较，AngⅡ1.0 μmol/L+EPO 10 U/L亚组和AngⅡ1.0 μmol/L+EPO 100 U/L亚组在24、48 h时系膜细胞增殖水平及ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白表达水平均下降，差异有统计学意义（P＜0.05），但与对照组及同浓度单纯EPO亚组比较，AngⅡ1.0 μmol/L+EPO组各亚组24、48 h时系膜细胞增殖水平及ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白表达水平均增高，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 Ang Ⅱ能刺激系膜细胞增殖，促进系膜细胞合成及分泌ColⅠ、Col Ⅳ和FN，EPO亦有一定程度类似作用，但两者同时存在时，EPO可拮抗AngⅡ诱导的系膜细胞增殖及ColⅠ、Col Ⅳ和FN的合成及分泌，提示EPO除可纠正肾性贫血外，可能对AngⅡ诱导的肾小球硬化具有抑制作用而保护肾功能。