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人骨形成蛋白2腺病毒表达载体转染体外培养兔腰椎间盘细胞的研究
引用本文:顾海伦,吕刚,刘莉,李建军,黄涛,王佳. 人骨形成蛋白2腺病毒表达载体转染体外培养兔腰椎间盘细胞的研究[J]. 中国修复重建外科杂志, 2006, 20(8): 820-824
作者姓名:顾海伦  吕刚  刘莉  李建军  黄涛  王佳
作者单位:1. 中国医科大学附属第一医院骨科,沈阳,110001
2. 中国医科大学公共卫生学院营养与食品卫生教研室
3. 中国医科大学附属第二医院骨科
摘    要:目的 研究人骨形成蛋白2腺病毒表达载体(adenovirus-mediated human bone morphogenetic protein 2 gene,Ad-hBMP-2)转染体外培养兔腰椎间盘细胞,分析其对腰椎间盘细胞的影响。方法 成年健康新西兰大白兔4只,体重4~5kg,取L2、L3到L6、L7节段椎间盘细胞体外培养。利用免疫荧光和蛋白印迹法(Western blot)检测空白对照组(未转染)、Ad-LacZ组[感染复数(multiplicity of infection,MOI)150MOI]和不同剂量Ad-hBMP-2(50、100、150MOI)组转染后细胞hBMP-2的表达水平。采用RT-PCR检测转染后细胞Ⅱ型胶原和aggrecan mRNA表达水平。结果 转染Ad-hBMP-2后通过免疫荧光和蛋白印迹法可见随转染剂量增加hBMP-2表达量逐渐增加,与50MOI组比较100MOI组升高102%,150MOI组升高183%。在转染后第6天RT-PCR结果显示转染组aggrecan和Ⅱ型胶原mRNA的表达高于对照组,并且随转染剂量增高mRNA的表达量均逐渐增加。aggrecan mRNA从50MOI组的61.7%增加到150MOI组的167.3%。Ⅱ型胶原mRNA从50MOI组的77.3%增加到150MOI组的169.0%。结论 Ad-hBMP-2可高效转染体外培养兔腰椎间盘细胞,随转染剂量增加hBMP-2表达量逐渐增加,同时上调aggrecan和Ⅱ型胶原mRNA的表达,并存在剂量依赖关系。

关 键 词:腺病毒  骨形成蛋白2  椎间盘细胞  基因转染
收稿时间:2005-08-22
修稿时间:2006-02-20

ADENOVIRUS-MEDIATED HUMAN BONE MORPHOGENETIC PROTEIN 2 GENE TRANSFERRED TO RABBIT INTERVERTEBRAL DISC CELLS IN VITRO
GU Hailun, LV Gang, LIU Li, et al. ADENOVIRUS-MEDIATED HUMAN BONE MORPHOGENETIC PROTEIN 2 GENE TRANSFERRED TO RABBIT INTERVERTEBRAL DISC CELLS IN VITRO[J]. Chinese journal of reparative and reconstructive surgery, 2006, 20(8): 820-824
Authors:GU Hailun   LV Gang   LIU Li   et al
Affiliation:Department of Orthopedics,First Affiliated Hospital, China Medical University, Shenyang Liaoning, 110001, P.R. China
Abstract:
Keywords:Adenoviral vector Bone morphogenetic protein 2 Intervertebral disc cells Gene transfection
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