用部分补平法克隆乙型肝炎病毒preS/S基因 |
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作者姓名: | 刘定燮 李德祥 骆抗先 |
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作者单位: | 1. 第一军医大学南方医院感染内科, 2. 解放军173医院, |
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摘 要: | 目的探讨利用Klenow大片段对DNA末端作部分补平而使非匹配粘端形成匹配粘端的可行性。方法用 BamHI、XbalI消解载体 pcDNA3,用 BglH、Hind Ⅲ从含乙型肝炎病毒全基因组质粒中切取 HBVpreS/S基因片段。 pcDNA3的 XbalI及 preS/S基因的 Hind Ⅲ切口端经 Klenow大片段作部分补平后形成二碱基的互补粘端。连接修饰 后的preS/S基因片段与pcDNA3并转化后筛选阳性克隆。结果限制性内切酶分析显示preS/S基因被定向克隆于载 体pcDNA3的预定位点。结论部分补平法是连接非匹配DNA粘性末端的较好选择。
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关 键 词: | 基因重组 Klenow大片段 乙型肝炎病毒 |
文章编号: | 1000-2588(2001)01-0060-02 |
修稿时间: | 2000-05-05 |
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