| 人突变DHFR基因高效逆转录病毒载体及其在小鼠造血细胞的表达 |
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| 引用本文： | 张文卿,许佐良,于杰,张桂国,徐光炜,王桂林,赵实诚.人突变DHFR基因高效逆转录病毒载体及其在小鼠造血细胞的表达[J].中国肿瘤生物治疗杂志,1997,4(2):85-89. |
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| 作者姓名： | 张文卿 许佐良 于杰 张桂国 徐光炜 王桂林 赵实诚 |
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| 作者单位： | 北京医科大学临床肿瘤学院!北京市肿瘤防治研究所北京100034，北京医科大学临床肿瘤学院!北京市肿瘤防治研究所北京100034，北京医科大学临床肿瘤学院!北京市肿瘤防治研究所北京100034，北京医科大学临床肿瘤学院!北京市肿瘤防治研究所北京100034，北京医科大学临床肿瘤学院!北京市 |
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| 摘 要： | 本文用转染了人突变DHFR基因逆转录病毒载体的新一代产病毒细胞AM12-S31,研究了其耐药特性、产生的病毒滴度及DHFR基因在小鼠造血细胞的表达.MTT法显示AM12-S31细胞对G418和氨甲喋呤耐受,对照细胞AM12对G418和MTX敏感.产生的病毒滴度为7.8×10~4～4.2×10~5CFU/ml,且为无复制活性病毒.将AM12-S31上清转染小鼠骨髓造血细胞后进行体内、外研究.CFU-GM分析显示:于不同C418浓度均有阳性克隆,而AM12上清转染组则无耐G418克隆.将转染后骨髓细胞从尾静脉回输给经致死剂量(900 rad)照射小鼠,MTX筛选(第一周为4mg/kg,每周二次;以后各周10mg/kg,每周二次),结果:实验组小鼠白细胞计数和红细胞压积逐渐恢复正常;对照组小鼠 30天内全部死亡.PCR分析耐G418 CFU-GM克隆和实验组小鼠骨髓细胞,均检测到标志基因Neo~R的存在.因此,初步研究表明该产病毒细胞能够产生高滴度、安全有效的非复制型逆转录病毒,并能成功转染小鼠造血细胞、表达目的基因,使在MTX筛选条件下重建小鼠造血功能.该研究为进一步开展耐药基因治疗打下了基础.
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| 关 键 词： | 耐药 骨髓移植 造血干细胞 基因转染 基因治疗 |
| 收稿时间： | 1997/3/17 0:00:00 |
| 修稿时间： | 5/2/1997 12:00:00 AM |
High-Efficiency Retroviral Vector Containing Human Mutated Dihydrofolate Reductase cDNA and Its Expression in Murine Hematopoietic Progenitor Cells |
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| Zhang Wenqing,Xu Zuoliang,Yu Jie,Zhang Guiguo,Xu Guangwei,Wang Guilin and Zhao Shicheng.High-Efficiency Retroviral Vector Containing Human Mutated Dihydrofolate Reductase cDNA and Its Expression in Murine Hematopoietic Progenitor Cells[J].Chinese Journal of Cancer Biotherapy,1997,4(2):85-89. |
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| Authors: | Zhang Wenqing Xu Zuoliang Yu Jie Zhang Guiguo Xu Guangwei Wang Guilin and Zhao Shicheng |
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| Institution: | Beijing Institute For Cancer Research , School Of Oncology , Beijing Medical University, Beijing 100034;Beijing Institute For Cancer Research , School Of Oncology , Beijing Medical University, Beijing 100034;Beijing Institute For Cancer Research , School Of Oncology , Beijing Medical University, Beijing 100034;Beijing Institute For Cancer Research , School Of Oncology , Beijing Medical University, Beijing 100034;Beijing Institute For Cancer Research , School Of Oncology , Beijing Medical University, Beijing 100034;Beijing Institute For Cancer Research , School Of Oncology , Beijing Medical University, Beijing 100034;Beijing Institute For Cancer Research , School Of Oncology , Beijing Medical University, Beijing 100034 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | drug resistance bone marrow transplantation(BMT) hematopoietic stem cell(HSC) gene transfection gene therapy |
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