| HIV-1 Tat真核表达载体的构建及在内皮细胞的表达 |
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| 引用本文： | 史继静,刘朝奇,杨凡,柳发勇,韩钰. HIV-1 Tat真核表达载体的构建及在内皮细胞的表达[J]. 实用医学进修杂志, 2008, 0(3) |
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| 作者姓名： | 史继静 刘朝奇 杨凡 柳发勇 韩钰 |
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| 作者单位： | 三峡大学分子生物学研究所 |
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| 摘 要： | 目的:构建HIV-1 Tat真核表达质粒,为研究Tat在HIV-1致病机制中的作用奠定实验基础。方法:以pCV1(tat and rev)质粒为模板,用PCR方法扩增HIV-1 Tat基因,克隆至p cDNA3.1( )表达载体,酶切及测序鉴定重组体。重组质粒转染ECV304细胞,用RT-PCR、转染HIV-1 LTR荧光报告基因的方法检测tat基因的表达及活性。结果:经酶切及测序鉴定,成功构建pcDNA3.1( )-Tat重组质粒。重组体转染ECV304细胞,建立稳定表达细胞株,应用RT-PCR可检测到Tat基因mRNA的表达;荧光仪检测Tat蛋白可明显促进荧光素酶在ECV304细胞内的表达。结论:成功构建HIV-1Tat真核表达载体,并建立了HIV-1 Tat内皮细胞稳定表达细胞株。
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| 关 键 词： | HIV Tat基因 真核表达载体 RT-PCR HIV-1 LTR-Luc报告基因 |
Cloning of Tat Gene of HIV-1 into a Mammalian Expression Vector and in Vitro Expression Studies |
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| Shi Jijing Liu Zhaoqi Yang Fang,et al.. Cloning of Tat Gene of HIV-1 into a Mammalian Expression Vector and in Vitro Expression Studies[J]. Journal of Practical Training of Medicine, 2008, 0(3) |
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| Authors: | Shi Jijing Liu Zhaoqi Yang Fang et al. |
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| Affiliation: | Shi Jijing Liu Zhaoqi Yang Fang,et al.Institute of Molecular Biology,China Three Gorges University,Yichang 443002,China |
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