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体外构建腺病毒介导骨形态发生蛋白2基因转染骨髓间充质干细胞复合纳米羟基磷灰石的植骨材料
引用本文:黄俊锋,王大平,何春耒,杨欣建,刘黎军,陈宏贤,彭亮权.体外构建腺病毒介导骨形态发生蛋白2基因转染骨髓间充质干细胞复合纳米羟基磷灰石的植骨材料[J].中国组织工程研究与临床康复,2010,14(38).
作者姓名:黄俊锋  王大平  何春耒  杨欣建  刘黎军  陈宏贤  彭亮权
作者单位:1. 广州医学院,广东省广州市510182;深圳市第二人民医院创伤骨科,广东省深圳市,518035
2. 深圳市第二人民医院创伤骨科,广东省深圳市,518035
3. 广州医学院,广东省广,州市510182
基金项目:深圳市卫生局科技计划项目资助 
摘    要:背景:随着组织工程和基因工程技术迅速发展,基因增强的组织工程骨为临床治疗骨缺损带来美好的前景.目的:观察经腺病毒介导的人骨形态发生蛋白2表达载体(Ad-BMP-2)转染后的兔骨髓间充质干细胞在纳米羟基磷灰石植骨材料上的黏附、增殖及骨形态发生蛋白2的表达情况.方法:用Ad-BMP-2转染兔骨髓间充质干细胞,免疫组化、蛋白印迹法检测转染后细胞内骨形态发生蛋白2的表达情况.将转染48 h的细胞均匀接种到纳米羟基磷灰石植骨材料上,扫描电镜观察细胞黏附状况,并采用MTT比色法测定骨髓间充质干细胞的增殖情况;消化收集黏附植骨材料上第3,5,7天的细胞,蛋白印迹检测黏附材料上细胞骨形态发生蛋白2的表达.结果与结论:转染后,骨髓间充质干细胞内骨形态发生蛋白2有高表达;扫描电镜见转染细胞在纳米羟基磷灰石材料孔隙周围及孔隙内黏附生长良好并大量增殖,MTT分析结果显示,纳米羟基磷灰石对骨髓间充质于细胞的体外增殖无抑制作用,复合后骨形态发生蛋白2有较高表达.结果表明经Ad-BMP-2转染后的骨髓间充质干细胞与纳米羟基磷灰石植骨材料生物相容性好,细胞在材料上能稳定长效地分泌骨形态发生蛋白2.

关 键 词:腺病毒载体  骨形态蛋白  纳米羟基磷灰石  骨髓间充质干细胞  组织工程骨

Adenovirus mediated bone morphogenetic protein-2 gene transfection of bone marrow mesenchymal stem cells combined with nano-hydroxyapatite to construct bone graft material in vitro
Huang Jun-feng,Wang Da-ping,He Chun-lei,Yang Xin-jian,Liu Li-jun,Chen Hong-xian,Pang Liang-quan.Adenovirus mediated bone morphogenetic protein-2 gene transfection of bone marrow mesenchymal stem cells combined with nano-hydroxyapatite to construct bone graft material in vitro[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2010,14(38).
Authors:Huang Jun-feng  Wang Da-ping  He Chun-lei  Yang Xin-jian  Liu Li-jun  Chen Hong-xian  Pang Liang-quan
Institution:Huang Jun-feng1,2,Wang Da-ping2,He Chun-lei1,Yang Xin-jian2,Liu Li-jun2,Chen Hong-xian2,Peng Liang-quan21Guangzhou Medical College,Guangzhou 510182,Guangdong Province,China,2Department of Orthopaedics,Shenzhen Second People's Hospital,Shenzhen 518035
Abstract:BACKGROUND:With advanced tissue engineering and gene engineering technologies,gene enhanced tissue engineered bone provides prosperous application for the repair of bone deficits.OBJECTIVE:To study the adhesion,proliferation and expression of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) on nano-hydroxyapatite (Nano-HA) bone graft material after transfection of adenovirus-mediated human bone morphogenetic protein-2 expression vector (Ad-BMP-2).METHODS:BMSCs were transfected using Ad-BMP-2.Immunohistochemistry ...
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