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阴道毛滴虫LAG1基因启动子区克隆及分析
引用本文:刘居理,许铭炎,许锦阶,傅玉才.阴道毛滴虫LAG1基因启动子区克隆及分析[J].寄生虫与医学昆虫学报,2007,14(3):129-134.
作者姓名:刘居理  许铭炎  许锦阶  傅玉才
作者单位:汕头大学医学院细胞衰老实验室,广东汕头,515041
基金项目:广东省卫生厅医学科研基金(B2006103)
摘    要:本研究旨在克隆并分析阴道毛滴虫LAG1基因启动子,为进一步研究在细胞衰老过程中LAG1基因的转录调控提供实验资料。预测启动子所在区域,用PCR技术扩增启动子区序列,并分别克隆入荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic及增强型绿色荧光蛋白报告基因载体pEGFP-1,用脂质体介导的方法瞬时转染EC109细胞,然后测定荧光素酶表达活性及观察绿色荧光蛋白的表达情况。结果表明在构建的6种荧光素酶报告基因表达体系及2种增强型绿色荧光蛋白报告基因表达体系中,表达载体pGL3-455(-455~ 55bp)、pGL3-417(-417~ 55bp)、pGL3-280(-280~ 55bp)、pGL3-202(-202~ 55bp)、pGL3-81(-81~ 55bp)的荧光素酶表达活性相近,均明显高于表达载体pGL3-47(-47~ 55bp)荧光素酶表达活性,而pGL3-47表达载体荧光素酶表达活性极低,与阴性对照活性相近,提示-47~ 55bp区无启动子活性。绿色荧光蛋白的表达情况也类似,pEGFP-81(-81~ 55bp)有明显的绿色荧光蛋白表达,而pEGFP-47(-47~ 55bp)和空载体pEGFP-1未见表达。因此-81~-47bp区域含有阴道毛滴虫LAG1基因转录所必需的基本启动子序列。

关 键 词:LAG1基因  阴道毛滴虫  启动子  报告基因载体  细胞转染
修稿时间:2006年12月13

CLONING AND ANALYSIS OF LAG1 GENE PROMOTER
LIU Ju-Li,XU Ming-Yan,XU Jin-Jie,FU Yu-Cai.CLONING AND ANALYSIS OF LAG1 GENE PROMOTER[J].Acta Parasitologica et Medica Entomologica Sinica,2007,14(3):129-134.
Authors:LIU Ju-Li  XU Ming-Yan  XU Jin-Jie  FU Yu-Cai
Abstract:
Keywords:LAG1  Trichomonas vaginalis  Promoter  Reporter gene vector  Cell transfection
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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