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日本血吸虫真核生物翻译起始因子2α亚基全长cDNA的克隆与功能分析
引用本文:卢晓昭,彭鸿娟,陈晓光.日本血吸虫真核生物翻译起始因子2α亚基全长cDNA的克隆与功能分析[J].南方医科大学学报,2003,23(4):296-299.
作者姓名:卢晓昭  彭鸿娟  陈晓光
作者单位:第一军医大学寄生虫学教研室,广东,广州,510515
基金项目:联合国发展计划署/世界银行/世界卫生组织热带病研究和培训特别规划署基金(A00690,A00191)~~
摘    要:目的对用表达序列标签(EST)策略从日本血吸虫(Schistosomajaponicum)尾蚴cDNA文库中筛选出的新基因进行全长cDNA克隆及功能预测。方法将插入于pTriplEx2 质粒上的cDNA进行测序,测序结果经BLASTn程序搜索,发现该插入cDNA序列与曼氏血吸虫真核生物翻译起始因子2α亚基(eukaryotic translation initiation factor 2 alpha subunit, eIF2α) 基因高度同源。根据该EST序列设计与pTriplEx2 质粒上的5'端测序引物相匹配的PCR下游引物,从该cDNA文库中扩出包含eIF2α全长ORF的cDNA片段。将PCR产物纯化后克隆到pGEM-T载体上,并对此克隆进行测序得到其全长cDNA序列。用NCBI 站点的BLASTx及BLASTn程序对所获得的新基因序列进行同源性搜索;用blast two sequence程序对同源性高的基因进行核苷酸及氨基酸水平的同源性比较。同时用网上分析软件进行基序和保守区域的搜索。结果发现一个与曼氏血吸虫eIF2α亚基mRNA高度同源的日本血吸虫新基因,核苷酸与氨基酸水平的同一性分别为87%和79%,编码由327个氨基酸组成的蛋白序列。结论用EST策略筛选到一个日本血吸虫新基因,编码eIF2α亚基,全长编码序列与曼氏血吸虫eIF2α亚基mRNA高度同源。

关 键 词:血吸虫  日本  血吸虫  曼氏  表达序列标签  基因克隆  真核类起始因子2
文章编号:1000-2588(2003)04-0296-04
修稿时间:2003年1月30日

Cloning and function analysis of full-length cDNA sequence of Schistosoma japonicum eukaryotic translation initiation factor 2 alpha subunit
LU Xiao-zhao,PENG Hong-juan,CHEN Xiao-guang.Cloning and function analysis of full-length cDNA sequence of Schistosoma japonicum eukaryotic translation initiation factor 2 alpha subunit[J].Journal of Southern Medical University,2003,23(4):296-299.
Authors:LU Xiao-zhao  PENG Hong-juan  CHEN Xiao-guang
Institution:LU Xiao-zhao,PENG Hong-juan,CHEN Xiao-guang Department of Parasitology,First Military Medical University,Guangzhou 510515,China
Abstract:
Keywords:Schistosoma japonicum  Schistosoma mansoni  expression seqnence tag  gene clone  eukaryotic initiation factor 2
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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