| 乳源抗菌-免疫调节融合蛋白原核表达和纯化 |
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| 引用本文： | 江良梁,秦宜德,周艳,王超,刘滋康.乳源抗菌-免疫调节融合蛋白原核表达和纯化[J].安徽医科大学学报,2008,43(3):260-263. |
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| 作者姓名： | 江良梁 秦宜德 周艳 王超 刘滋康 |
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| 作者单位： | 安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室,合肥,230032;安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室,合肥,230032;安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室,合肥,230032;安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室,合肥,230032;安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室,合肥,230032 |
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| 基金项目： | 安徽省教育厅自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的 构建乳铁蛋白抗菌肽(Lfcin B)与免疫调节肽(PGPIPN)融合肽表达质粒,并在大肠杆菌BL21中表达及纯化.方法 采用重叠延伸PCR技术获得融合肽基因片段,并构建到原核表达载体pGEX-KG中,挑选阳性重组子,经限制性内切酶鉴定后转化到大肠杆菌BL21,然后用IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE及Western-blot方法鉴定表达的融合蛋白.用Glutathione Sepharose 4B亲和层析方法纯化融合蛋白.结果 成功构建原核表达质粒pGEX-KG-FP,并在大肠杆菌BL21中诱导其高表达.SDS-PAGE及Western-blot分析显示,特异性的抗GST单克隆抗体所识别的融合蛋白分子量与理论值相近.经Glutathione Sepharose 4B纯化后,得到较纯的GST-FP融合蛋白.结论 构建了原核表达的融合蛋白质粒,并高效表达和纯化了该融合蛋白.
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| 关 键 词： | 大肠杆菌 肽类/遗传学 基因表达 重组融合蛋白质类 |
| 文章编号： | 1000-1492(2008)03-0260-04 |
| 修稿时间： | 2008年3月18日 |
Expression and purification of antibacterial-immunomodulating fusion protein |
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