新型肝损伤血清标志物Pep5定量检测方法的建立及临床应用 |
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作者姓名: | 傅海媛 侯利平 周晓明 黄亚娟 宋纯艳 孙云波 汪洋 杨保安 肖汉族 甄蓓 魏开华 王海滨 |
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作者单位: | 解放军总医院;军事医学科学院放射与辐射医学研究所;北京蛋白质组研究中心,蛋白质组学国家重点实验室,国家蛋白质科学中心(北京);安徽省芜湖市第二人民医院;北京正旦国际科技有限责任公司;湖南金健药业有限责任公司;解放军三○二医院 |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划863项目(2012AA020205);卫生部传染病重大专项(2008ZX10002-016) |
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摘 要: | 目的建立定量检测血清多肽Pep5的酶联免疫吸附方法(ELISA),用于判定肝损伤进程的研究。方法以待测血清样本稀释液包被酶联板,5%脱脂奶粉封闭,辣根过氧化物酶标记的抗Pep5单克隆抗体作为标记抗体,建立定量检测人血清多肽Pep5的ELISA,并用于临床检测690例肝损伤及健康血清样本。结果灵敏度为1.25ng/mL;线性范围(0~24ng/mL)内相关系数为0.998 7;与乙酰胆碱酯酶、层黏连蛋白、透明质酸、三型前胶原交叉反应率小于1.00%;添加回收率在99.09%~107.08%;批内、批间变异系数(CV)分别为5.62%~7.32%、6.21%~6.45%。与其他肝损伤指标乙酰胆碱酯酶试剂盒进行对比试验,表明两种检测方法有一定的相关性(r=0.68)。临床检测结果表明血清多肽Pep5水平随着肝损伤程度加重而升高,与正常血清差异有统计学意义(P0.01)。结论多肽Pep5可用于肝损伤进程定量血清学检测,检测方法简便、可靠,为后续深入研究多肽Pep5的功能及相关诊断试剂盒的研制和开发提供了科学依据。
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关 键 词: | 多肽Pep5 酶联免疫吸附法 肝损伤 血清学诊断 |
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