TLR/NF?κB信号通路在甲基苯丙胺诱导的原代小胶质细胞炎性反应中的作用

目的：探讨Toll样受体（Toll like receptor，TLR）/核因子（nuclear factor，NF）?κB信号通路在甲基苯丙胺（methamphetamine，METH）引起原代小胶质细胞激活及炎性因子释放的作用。方法：分离培养原代小胶质细胞，免疫荧光法鉴定原代小胶质细胞纯度。细胞予METH（300 μmol/L）染毒0 min、15 min、30 min、1 h、3 h、6 h、12 h和24 h，蛋白免疫印迹检测原代小胶质细胞的激活情况及其NF?κB通路激活情况，real?time PCR检测炎性因子［肿瘤坏死因子?α（tumor necrosis factor? α，TNF?α）、白介素?1β（interleukin?1β，IL?1β）、白介素?6（interleukin?6，IL?6）］和TLR1~9、11 mRNA的表达。结果：分离出的原代小胶质细胞纯度达到95%以上。METH暴露后原代小胶质细胞激活，其激活标志物IBA?1水平增高，NF?κB通路被激活，炎性因子（TNF?α、IL?1β、IL?6）和TLR2、4~5、7~9、11的mRNA水平明显升高，TLR1的mRNA水平明显降低，差异具有统计学意义（P < 0.05）。结论：METH可通过调节TLR/NF?κB信号通路激活原代小胶质细胞并促进其释放炎性因子，因而TLR可作为METH神经炎性反应干预的潜在靶点，具有一定的治疗意义。