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| 丁型肝炎病毒复制包装载体的构建 | |
| 引用本文： | 李颖,张五星,周伟,王学军.丁型肝炎病毒复制包装载体的构建[J].中国现代医学杂志,2017,27(11):31-35. |
| 作者姓名： | 李颖 张五星 周伟 王学军 |
| 作者单位： | 1.河北北方学院 研究生部，河北 张家口 075061；2.中国人民解放军第309医院 肾脏内科，北京 100091；3.军事医学科学院 放射与辐射医学研究所，北京 100850 |
| 基金项目： | 国家863青年科学家项目（No：2015AA020946）；北京市科技新星项目（No：Z171100001117119） |
| 摘 要： | 目的 构建一种可以实现丁型肝炎病毒（HDV）复制包装的HDV转座子载体。方法 采用分子克隆方法构建含HDV复制子和乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）表达框的转座子（PB）载体PB126I3，将构建好的载体转染HuH-7细胞，转染48 h后用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白（GFP）的表达，转染48 h后收集细胞上清用酶联免疫吸附法（ELISA）检测HBsAg的表达，质粒转染细胞8.5 d后提取病毒用逆转录荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测HDV核糖核酸（RNA）的含量；同时细胞上清病毒浓缩后感染HBV受体钠离子/牛磺胆酸共转运蛋白（Na+/NTCP）稳定转染的HepG2.N9细胞系并于感染后第7天用免疫荧光检测细胞内HDVδ抗原的表达。结果 HDV复制包装载体PB126I3瞬时转染HuH-7后细胞上清可检测到HBsAg的表达和较高滴度的HDV颗粒，并且该病毒颗粒感染HepG2.N9细胞7 d后细胞内可检测到HDVδ抗原。结论 HDV复制包装转座子载体构建成功，为未来HDV的大规模复制包装以及尝试建立HDV稳定转染细胞系提供前期基础。 |
| 关 键 词： | 丁型肝炎病毒 载体构建 复制 包装 瞬时转染 |
| 收稿时间： | 2017/3/3 0:00:00 |
Construction of hepatitis D virus replication vector |
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| Ying Li,Wu-Xing Zhang,Wei Zhou,Xue-Jun Wang.Construction of hepatitis D virus replication vector[J].China Journal of Modern Medicine,2017,27(11):31-35. | |
| Authors: | Ying Li Wu-Xing Zhang Wei Zhou Xue-Jun Wang |
| Institution: | 1. Graduate Faculty, Hebei Northern College, Zhangjiakou, Hebei 075061, China; 2. Department of Nephrology, the 309th Hospital of PLA, Beijing, 100091, China; 3. Institute of Radiation Medicine, Military Academy of Medical Sciences, Beijing, 100850, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | hepatitis D virus vector construction replication packaging transient transfection |
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