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| 人诱导性多能干细胞向神经干细胞分化的方法探讨 | |
| 引用本文： | 冯年花,谢安,娄远蕾,阮琼芳,郭菲,杨阳,潘长福,邓志锋,汪泱. 人诱导性多能干细胞向神经干细胞分化的方法探讨[J]. 中国病理生理杂志, 2010, 26(8): 1662-1664. DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2010.044 |
| 作者姓名： | 冯年花 谢安 娄远蕾 阮琼芳 郭菲 杨阳 潘长福 邓志锋 汪泱 |
| 作者单位： | 南昌大学 1. 泌尿外科研究所; 2. 第二附属医院神经外科; 3. 研究生院医学部, 江西 南昌 330006 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，国家科技支撑计划资助项目 |
| 摘 要： | 目的:探讨人诱导性多能干细胞(iPS细胞)体外定向分化为神经干细胞(NSCs)的方法。方法:人iPS细胞悬浮培养4 d形成的拟胚体(EB)经维甲酸(RA)诱导4 d,诱导后的EB在无血清培养基中筛选并扩增培养。倒置显微镜下观察诱导后细胞的形态变化,RT-PCR检测iPS细胞多能性基因Nanog、Oct4和Sox2的表达,免疫荧光法检测NSCs特异性标志物Nestin、神经元标志物β-tubulinⅢ和神经胶质细胞标志物GFAP的表达。结果:(1)人iPS细胞在饲养层细胞上稳定传代,表达多能性基因Nanog、Oct4和Sox2,去除饲养层后悬浮培养能形成球形EB;(2)经RA诱导后的EB在无血清培养基中筛选培养第1 d贴壁生长,周围爬出细胞;第3 d,在高倍镜下可见中央聚集的细胞呈环形的rosette结构,rosette结构增多到第7 d达高峰。对照组未观察到rosette结构。随后大部分rosette细胞脱离瓶壁悬浮生长,形成神经球样克隆。免疫荧光显示神经球呈nestin阳性表达。贴壁培养的神经球能分化成β-tubulinШ和GFAP阳性细胞。结论:RA诱导结合无血清培养基筛选法能诱导iPS细胞高效分化为NSCs。 |
| 关 键 词： | 诱导性多能干细胞 神经干细胞 维甲酸 |
| 收稿时间： | 2010-01-14 |
| 修稿时间： | 2010-03-30 |
Differentiation of human induced pluripotent stem cells into neural stem cells |
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| Abstract: | |
| Keywords: | Induced pluripotent stem cells Neural stem cells Retinoic acid Human |
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