| 日本血吸虫26kDa谷胱甘肽S-转移酶在大肠杆菌的温控高效表达及鉴定 |
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| 引用本文： | 李传明,石佑恩.日本血吸虫26kDa谷胱甘肽S-转移酶在大肠杆菌的温控高效表达及鉴定[J].中国血吸虫病防治杂志,1998(6). |
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| 作者姓名： | 李传明 石佑恩 |
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| 作者单位： | 同济医科大学寄生虫学教研室!武汉430030 |
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| 基金项目： | 总理预备金血吸虫疫苗项目 |
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| 摘 要： | 以重组质粒pSj26为模板，PCR扩增出编码26kDa谷胱甘肽S-转移酶（Sj26GST）的cDNA，双酶切后克隆到pBV220DNA，构建pBV220-Sj26温控表达载体，CaCl2法转化大肠杆菌DH5α，氨苄青霉素筛选转化子，酶切图谱分析及PCR鉴定阳性克隆。阳性克隆菌在30℃培养，42℃温控表达Sj26。测定表达产物GST活性，并用rSj26抗原免疫的鼠血清及日本血吸虫感染鼠血清进行Dot－ELISA和Westernblot检测其抗原性。实验结果表明PBV220－Sj26温控表达产物具有GST酶活性。SDS－PAGE经考马斯亮蓝染色可见染色较深的26kDa条带，该条带占菌体总蛋白的33．83％。抗rSj26的免疫鼠血清及日本血吸虫感染鼠血清均可识别26kDa条带。实验结果表明日本血吸虫26kDa条带能在大肠杆菌温控高效表达。
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| 关 键 词： | 日本血吸虫 谷胱甘肽S-转移酶 表达 Dot-ELISA Westernblot |
EXPRESSION AND IDENTIFICATION OF 26 kDa GST FROM CHINESE STRAIN OF SCHISTOSOMA JAPONICUM |
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| Li Chuanming, Shi Youen.EXPRESSION AND IDENTIFICATION OF 26 kDa GST FROM CHINESE STRAIN OF SCHISTOSOMA JAPONICUM[J].Chinese Journal of Schistosomiasis Control,1998(6). |
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| Authors: | Li Chuanming Shi Youen |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Schistosoma japonicum glutathione S-transferase expression Dot-ELISA Western blot |
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