| 嵌合轻链为模板导向筛选人源性抗肝癌抗体重链Fd片段 |
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| 引用本文： | 包国强,马庆久,邢金良,杨向民,陈志南. 嵌合轻链为模板导向筛选人源性抗肝癌抗体重链Fd片段[J]. 中国肿瘤生物治疗杂志, 2004, 11(3): 161-165 |
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| 作者姓名： | 包国强 马庆久 邢金良 杨向民 陈志南 |
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| 作者单位： | 1. 第四军医大学唐都医院普通外科,西安,710038
2. 第四军医大学,基础部细胞工程研究中心,西安,710032 |
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| 摘 要： | 目的:利用噬菌体抗体库和导向选择技术,以抗HAb18G嵌合抗体轻链为模板,筛选人源性抗肝癌抗体Fd片段.方法:利用RT-PCR自肝癌患者外周血淋巴细胞中扩增全套人抗体重链Fd基因片段,克隆入含嵌合L链的展示载体pComb3X,建立人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库.然后,利用大肠杆菌表达的非融合HAb18GE为抗原进行亲和筛选,利用pⅢ融合抗体的形式进行克隆鉴定,并对筛选出的杂合抗体进行初步的功能检测.结果:构建成功库容量为2×107PFU的杂合人-鼠噬菌体抗体库,利用非融合表达的HAb18GE进行6轮筛选.ELISA及流式细胞仪检测,其中7个克隆呈特异性阳性反应.其中克隆AP6-2和AP6-7亲和力较高,测序显示其基因序列相同,且与亲本抗体恒定区序列相同,属IgG2亚类,可变区属VH3家族.结论:通过本实验,利用嵌合轻链为模板,进行Fd片段替换,成功筛选到人源性抗体Fd片段.
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| 关 键 词： | 噬菌体抗体库 肝癌 导向筛选 |
| 文章编号： | 1007-385X(2004)03-0161-05 |
| 收稿时间： | 2003-09-15 |
| 修稿时间： | 2003-09-15 |
The Screening of Human Anti-Hepatoma Fd Fragments Guided with the Chemeric Light Chain of HAb18 |
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| BAO Guo-qiang,MA Qing-jiu,XING Jin-liang,YANG Xiang-min and CHEN Zhi-nan. The Screening of Human Anti-Hepatoma Fd Fragments Guided with the Chemeric Light Chain of HAb18[J]. Chinses Journal of Cancer Biotherapy, 2004, 11(3): 161-165 |
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| Authors: | BAO Guo-qiang MA Qing-jiu XING Jin-liang YANG Xiang-min CHEN Zhi-nan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | phage antibody library hepatoma guided-selection |
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