序列相似性家族134成员B介导的内质网自噬对内毒素/脂多糖诱导的小鼠树突状细胞凋亡的影响题录 |
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引用本文: | 段昱,姚人骐,郑丽玉,董宁,吴瑶,姚咏明,戴新贵.序列相似性家族134成员B介导的内质网自噬对内毒素/脂多糖诱导的小鼠树突状细胞凋亡的影响题录[J].中华烧伤杂志,2023(9). |
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作者姓名: | 段昱 姚人骐 郑丽玉 董宁 吴瑶 姚咏明 戴新贵 |
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作者单位: | 1. 南方医科大学附属郴州医院(郴州市第一人民医院)重症医学科;2. 解放军总医院医学创新研究部转化医学研究中心 |
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基金项目: | 国家自然科学基金重点项目(82130062, 82241062); |
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摘 要: | 目的探讨序列相似性家族134成员B(FAM134B)介导的内质网自噬对内毒素/脂多糖(LPS)诱导的小鼠树突状细胞(DC)凋亡的影响, 为改善创面感染等引起的脓毒症免疫抑制提供依据。方法采用实验研究方法。取第3~10代对数生长期的小鼠DC系DC2.4进行实验。将DC分为LPS刺激0 h(不刺激)组、LPS刺激6 h组、LPS刺激12 h组、LPS刺激24 h组和LPS刺激72 h组, 采用1 μg/mL LPS(浓度下同)培养相应时间后, 采用蛋白质印迹法检测FAM134B、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)以及转运蛋白SEC61B蛋白表达, 并计算LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值(样本数为3)。将DC分为进行相应处理的磷酸盐缓冲液(PBS)组与LPS组, 培养24 h, 采用免疫荧光法检测FAM134B表达情况及其分别与溶酶体探针、LC3B共定位情况, 通过透射电子显微镜观察细胞内自噬溶酶体数量。将DC分为转染含FAM134B基因小干扰RNA序列的慢病毒的敲减FAM134B组与转染空载慢病毒的空载体组, 转染后72 h, 于倒置荧光相差显微镜下观察细胞荧光表达情况, 另将仅常规培养的D...
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关 键 词: | 脓毒症 树突细胞 细胞凋亡 序列相似性家族134成员B 内质网自噬 免疫功能障碍 |
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